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雌激素及相关因子对肾阳虚模型大鼠精子发生的影响

李蕊  
【摘要】: 目的: 观察不同剂量腺嘌呤诱导的肾阳虚不育模型大鼠血清雌二醇(Estradiol, E2)水平及相关因子芳香化酶P450 (Aromatase cytochrome, P450arom)、细胞色素P-19 (Cytochrome P-19, CYP19)、转化生长因子1 (Transforming growth facter beta1, TGF-β1)在睾丸中的定位及表达,探讨肾阳虚致精子发生障碍的病理机制。 方法: 将32只成年雄性SD大鼠随机分为4组(低、中、高剂量组,正常对照组),每组8只。分别用腺嘌呤100mg/kg·d、150 mg/kg.、200mg/kg·d,给低、中、高剂量组大鼠灌胃30天,诱导肾阳虚不育模型;正常对照组给与0.9%的生理盐水灌胃30天。观察大鼠体征变化,用放射免疫法测定血清性激素水平,生化检测方法检测血清中尿素氮(Blood urea nitrogen, BUN)、肌酐(Serum creatinine, SCr),全自动精子分析仪进行精子计数,HE染色观察大鼠睾丸、肾脏的形态学改变;免疫组织化学SABC法及Western blot方法检测P450arom、CYP19和TGF-β1在大鼠睾丸中的定位及表达。 结果: 与正常对照组相比,各模型组睾酮(Testosterone , T)、雌二醇(Estradiol, E2)显著降低(P0.05);卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone, FSH )、促黄体激素(Luteotrophic hormone, LH)水平无显著性差异(P0.05);SCr、BUN水平显著升高(P0.05);精子数目明显减少(P0.05);而在不同模型组之间,其变化均无显著性差异(P0.05)。各模型组大鼠睾丸均出现了生精小管中生精细胞排列紊乱,细胞疏松,生精小管之间的结缔组织增多,间质细胞数量明显减少,管腔内生殖上皮变薄,精子数目减少,大部分管腔中可见脱落的精子细胞;肾小管内有大量结晶物沉着,且有异物肉芽肿形成,占据整个管腔,肾小管上皮肿胀、坏死、脱落,肾小管显著扩张成囊状,皮质、髓质间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,可见纤维素样坏死;且随着腺嘌呤给药剂量的增加,肾脏、睾丸的损害呈进行性加重。CYP19主要在睾丸的间质细胞、长形精子细胞表达;P450arom、TGF-β1主要表达在睾丸的间质细胞。与正常对照组相比,模型组大鼠睾丸中TGF-β1的表达显著增强(P0.05),而CYP19、P450arom的表达则明显降低(P0.05);三个模型组之间相比,TGF-β1、CYP19、P450arom的表达均无显著性差异(P0.05)。 结论: 不同剂量腺嘌呤诱导的大鼠肾阳虚模型均出现了血清E2水平降低及精子数目的减少,同时伴有睾丸TGF-β1、CYP19和P450arom的表达改变,初步说明雌激素及相关因子与肾阳虚引起的精子发生障碍有关。


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