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姜黄素对阻断NF-κB信号通路抑制人卵巢癌细胞株3AO增殖

李帆  
【摘要】: 研究目的 1.姜黄素作用卵巢癌细胞株3AO后生长情况 2.初步研究姜黄素作用卵巢癌细胞株3AO后NF-κB家族蛋白表达的变化。 研究方法 1.体外培养卵巢癌细胞株3AO。 2.采用MTT方法检测对照组、不同浓度(20、40、80μg/L)Cur干预组(干预24、48小时)吸光值,计算细胞抑制率值。 3.应用流式细胞术检测不同浓度(20、40、80μg/L)Cur干预24h后细胞周期的改变。 4.应用光学显微镜观察不同浓度(20、40、80μg/L)Cur干预细胞24h后卵巢癌细胞形态改变。 5.利用Western blot方法检测Cur(20、40、80μg/L)干预24小时后NF-κB、p-NF-κB在转录及翻译水平的表达以及其抑制物IκB、p-IκB在翻译水平的表达,与对照组进行比较。 6.免疫荧光化学方法检测Cur(20、40、80μg/L)干预3AO细胞24小时后NF-κB表达。 7.RT-PCR技术检测Cur(20、40、80μg/L)干预3AO细胞24小时后NF-κBmRNA的表达。 研究结果 1.姜黄素对人卵巢癌细胞株3AO生长的抑制作用,呈剂量时间依赖性。 2.流式细胞仪分析证实姜黄素能使3AO细胞周期阻滞于G0/G1期。 3.光学显微镜观察显示:随着姜黄素浓度的增高,卵巢癌细胞株形态逐渐发生变化,透光性及折光性降低,细胞皱缩,细胞数量减少,凋亡细胞增多。 4.Western blot结果显示随姜黄素作用浓度的增加,NF-κB、p-NF-κB蛋白表达水平明显下降,IκB、p-IκB蛋白表达有增加。 5.免疫荧光结果显示随着姜黄素浓度的增高,细胞内NF-κB表达逐渐减少。 6.RT-PCR结果显示不同浓度姜黄素培养的卵巢癌细胞,随着药物浓度增高,NF-κB mRNA表达逐渐减弱,差异有统计学意义。 研究结论 姜黄素能对3AO细胞有明显的抑制增殖作用,阻止细胞进入有丝分裂的S期,此作用可以通过下调NF-κB蛋白表达及磷酸化实现,这是姜黄素抑制卵巢癌细胞生长分子机制之一。


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