大豆异黄酮的提取制备技术及分析测试方法的研究

【摘要】： 异黄酮是黄酮类化合物中的一种，主要存在于豆科植物中。大豆异黄酮 是大豆生长中形成的一类次生代谢产物，它主要存在的化学形式是结合型的 糖甙。异黄酮是具有重要生物学活性的化合物，在大豆和大豆制品中含量丰 富。它可用于药品，保健食品等领域。 本研究在课题组前期工作的基础上，作者以豆粕为原料，对提取大豆粗 异黄酮的工艺作以研究；其提取物用盐酸酸解；及酸解产物进行了大孔树脂 吸附法分离，纯化大豆异黄酮的实验研究。并采用金雀异黄素作为标准品建 立了紫外分光光度法和高效液相色普法测定其大豆异黄酮和金雀异黄素的含 量。研究结果表明： 1.提取大豆异黄酮的最佳路线中各因素为：M乙醇，回流提取n次， 每次a小时，溶剂原料比b。干膏率为32.73％，异黄酮含量22.24％，金雀异 黄素含量0.705％。 2.盐酸水解大豆异黄酮的最佳路线中各因素为：0.1mol/L盐酸，时间3 小时，温度40℃，盐酸体积原料比5∶1。金雀异黄素含量5.95％，分解率为 5.25％。 3.大孔树脂分离，纯化最佳路线中各因素为：50％乙醇，溶剂样品比230∶ 1，洗脱时间2小时。 4.高效液相色谱条件：色谱柱为Hypersil BDS C18（250mm×4.6mm， 5μm），流动相乙腈-0.003mol/L磷酸氢二钠，流速1.0ml/min，柱温35℃， 检测波长259nm。精密度RSD为0.056％。金雀异黄素的加样回收率±RSD 为（99.67±0.056）％。 本研究为大豆异黄酮作为产品开发利用提供了坚实的理论基础，具有极强 的实践指导意义。