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动物脂肪细胞膜蛋白组成及猪脂肪细胞特异膜蛋白的分离鉴定

郝军元  
【摘要】: 脂肪细胞具有蓄积脂肪的独特功能。多年来,为了解其功能的控制机制,人们一直致力于研究脂肪细胞的代谢和结构特点。目前通过SDS-PAGE、Western-blot和单克隆抗体等技术,发现不同动物脂肪细胞膜蛋白的组成存在差异。由于细胞膜在细胞间的信息传递、营养物质的运输、激素信号的识别等过程中起着重要的作用,因此,人们推测在脂肪细胞膜上存在着有别于其它组织细胞的膜蛋白成分,对脂肪在脂肪细胞中的沉积发挥着重要的作用。动物体内脂肪的沉积及脂肪组织的生长是脂肪细胞内脂滴蓄积和脂肪细胞不断分化的结果,脂肪的过度沉积不仅降低畜产品的品质,而且严重危害人类的健康,已成为养殖业和公众健康关注的主要问题之一。因此,研究脂肪细胞的膜蛋白组成及其特异膜蛋白成分,对了解脂肪细胞膜蛋白的结构和功能,寻找减少动物体脂肪沉积的技术途径具有重要意义。 本研究采用蔗糖密度梯度离心制备了不同种动物和不同品种猪脂肪细胞膜蛋白,以及同一品种猪不同脂肪细胞和不同组织器官细胞膜蛋白,通过SDS-PAGE和薄层扫描对细胞膜蛋白的组成、分子量及百分含量进行分离和测定,通过Western-blot对猪皮下脂肪细胞特异膜蛋白进行鉴定。结果表明,猪、牛、羊、鸡、兔、鼠和人脂肪细胞有18~22种膜蛋白,其中仅有110、94、65、54、44和35 kDa 6种膜蛋白存在于所有动物脂肪细胞上,151、80、144、89、76、86、55、85、61、99、71、23、116和82 kDa膜蛋白分别存在于不同动物脂肪细胞膜上,不同动物脂肪细胞膜蛋白组成和含量存在较大差异。滇昆、滇玉、滇陆、长撒、约长撒、DLY、撒坝和长白不同品种猪脂肪细胞有18~22种膜蛋白,其中有12种相同的膜蛋白成分,分子量分别为110、102、94、72、65、55、 52、50、40、36、30不l一21kDa,85、138、37、31和24 kDa膜蛋白分别存在于不同品 种猪脂肪细胞上,不同品种猪脂肪细胞膜蛋白组成较为相似,但各种膜蛋白的含量不同。 长撤猪皮下脂肪细胞有19种膜蛋白,心、肝、脾、肺、肾和肌肉细胞及肾脂、肠 脂和腹部脂肪细胞有13一24种膜蛋白,红细胞膜有6种膜蛋白。经Westem一blot鉴定, 皮下脂肪细胞有8种特异性膜蛋白,分别为1一0.7、104.0、40.0、31.1、29.4、25.4、23·5 和22.okDa,脂肪细胞与其它组织细胞膜蛋白的组成及含量存在较大差异。 纯化猪皮下脂肪细胞40 kDa特异膜蛋白,皮下多点免疫家兔,8周后采血.,制备了 较高效价抗血清。


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