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NO在偏头痛痛觉信息中枢传递中作用的基础研究

王贺波  
【摘要】: 目的: 1.制备反映可靠的偏头痛急性发作的动物模型,为偏头痛等血管性头痛发病机制、治疗药物和手段的研究提供实验基础; 2.观察NO在偏头痛痛觉信息中枢传递中作用; 方法: 1.动物模型的建立及鉴定:体重为2.5~3.2kg的短毛猫20只,随机分为4h(n=6)、8h(n=6)、20h(n=8)三个区组,每个区组随机分成假手术对照组和刺激组。实验动物以兽用氟胺酮(0.01ml/kg)麻醉后,用电钻钻开颅骨,暴露SSS。假手术对照组不予电刺激;刺激组分别于手术后4h、8h和20h,以单刺激为脉宽250μs、电流1.5mA、频率3Hz的方波刺激SSS区硬脑膜2小时。刺激结束后1小时灌注固定,并取脑干及上颈髓,应用免疫组化技术,行延髓和上颈髓冰冻切片c-fos染色。 2.NO在三叉神经血管系统中枢痛觉信息传递中作用:体重为2.5~3.2kg短毛猫40只,随机分为假手术对照组、刺激组、生理盐水组、L-NAME(100mg/kg)组和7-NI(10mg/kg)组,分组处理后,应用免疫组化技术,延髓和上颈髓连续切片,行冰冻切片c-fos及nNOS染色。 结果: 1.动物模型的建立及鉴定:C-fos免疫反应阳性神经元主要位于延髓三叉神经脊束核尾侧部浅层和C_1后角的Ⅰ、Ⅱ层,为核染。在孤束缝核和中央核及中央导水管周围X层也有c-fos免疫反应阳性神经元表达。假手术对照组动物c-fos免疫反应阳性神经元随着手术后时间的延长而减少;8h刺激组和20h刺激组c-fos免疫反应阳性神经元较相应区组内假 中文摘要 手术对照组明显增多。 2.NOS抑制剂对。-fos表达的影响:C-fos免疫反应阳性神经元主要位于 延髓三叉神经脊束核尾侧段和CI后角l、11层,表现为核染。LNAME 组和 7-NI组两组之间的 C-fos免疫反应阳性神经元数无显著差异,但均 较刺激组和生理盐水组明显减少。刺激组动物的c-fos免疫反应阳性神 经元数较假手术对照组明显增加,而与生理盐水组无显著差异; 3.nNOS表达及NOS守制齐对其表达的影响:nNOS免疫反应阳性一经 元主要位于延髓三叉神经脊束核尾侧段和CI后角的浅层门门层),与 C-fOS表达的部位相似,但以胞浆染色为主,无染色的胞核清晰可见; 其深层、孤束缝核和中夹核、中央导水管两侧可见数个直径较大、轴突 较长的 nNOS免疫反应阳性神经元;而 nNOS免疫反应阳性神经纤维 遍布后角及中央导水管两侧,并似向前角和后角浅层方向投射,其中后 角浅层着色明显比其它部位深。电刺激后可见较长的纤维呈串珠样改 变。刺激组动物的nNOS免疫反应阳性神经元数较假手术对照组明显 明显增加,而与生理盐水组无显著差异;LNAME组和 7-NI组的 nNOS 免疫反应阳性神经元数均较刺激组和生理盐水组明显减少,但两组之间 无显著性差异。此结果与NOS抑制剂对C1OS表达的影响相似。 结论: 1.刺激SSS区硬脑膜可激活与在血管性头痛痛觉中枢传递中起重要作用 的三叉神经二级神经元;延长手术和刺激间隔的时间可减少非刺激固素 的影响;猫 SSS区硬脑膜刺激诱导三叉神经脊束核。-fos表达的模型可 ‘作为研究偏头痛等血管性头痛病理生理机制、治疗药物和方法的稳定可 靠的动物模型。 2.No可影响三叉神经血管系统的痛觉信号传递,卜NAME和7-M可能通 过抑制NO的生成,阻断三叉神经脊束核神经元的激活,从而终止偏头 痛发作。NOS抑制剂有可能成为将来治疗偏头痛发作的一种新型特效 3 中文摘要 药物。


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