RANKL/OPG在强直性脊柱炎外周关节骨质破坏病理机制中的作用

【摘要】： 目的： 本研究拟通过检测RANKL、OPG和CD68蛋白在强直性脊柱炎(AS)外周关节滑膜组织中的表达，并以类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)患者和健康对照者的外周关节滑膜组织为对照，了解细胞核因子кB受体活化因子配基(RANKL)、护骨素(OPG)和代表单核/巨噬细胞标记的CD68蛋白表达与AS患者炎性关节病理改变及疾病活动性的相关性，试图从炎性关节局部RANKL/OPG平衡调节这一角度进一步探讨AS关节炎症及骨质破坏的发病机制，为AS病情评判与治疗提供理论基础。 方法： 应用单克隆抗体，通过免疫组织化学方法检测13例AS、16例RA、17例OA及6例健康对照关节滑膜组织中RANKL、OPG、CD68蛋白表达及分布状况；鉴于抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)是破骨细胞或前体细胞的一种标志酶，本研究还采用酶组织化学法分析各组滑膜组织TRAP染色阳性细胞表达及分布状况，通过计算机辅助图象分析系统和半定量分析方法确定RANKL、OPG、CD68以及TRAP在各滑膜组织中表达量之间的差异，分析各因子表达与炎性指标及关节X线分期之间的相关性。 结果： (1)OPG蛋白在所有13例AS滑膜组织中均有阳性表达，阳性细胞主要分布于滑膜衬里层、衬里下层区域，滑膜软骨交界区OPG表达明显低于滑膜衬里层和衬里下层；2例健康对照滑膜组织中有 军医进修学院博土学位论文RANKL10pe在牙直性脊柱 周关节骨质玻坏痛理机删中的作用 阳性表达，但明显低于AS患者组。RA及OA患者组未见OPG阳 性表达。 （2）AS患者组滑膜组织RANKL表达水平明显升高，阳性细胞 主要见于滑膜组织衬甩层和滑膜软骨交界区。AS 患者组RANKI。 蛋白与RA患者组无明显差异刀A患者组和健康对照组滑膜织织中 未见阳性表达信号。 （3）AS和 RA滑膜组织中 RANKL表达量与关节 X线分州呈小 十 关（十 关系数 r分别为 0．7 3，0．41，P值分别为 0．0 0 3，0．0 ZI）。 （4）CD68蛋白在各组滑膜组织中滑膜细胞中均有表达，主要 表达于滑膜衬里层，AS及RA 患者组滑膜组织中表达强度显著高 于OA和健康对照组。 （5）TRAP染色结果表明，RANKL丰富表达的 AS和 RA i A· 滑膜组织中，TRAP 染色阳性细胞数量增加，AS 患者组滑腴组织 TRAP 阳性细胞百分数显著低于RA 组。在滑膜－软骨交界区域， ＊＊＊P着色强度明显增加，＊A及正常对照组滑膜中 ＊＊AP阳忖细 胞少见。 （6）RA组RANKL表达与滑膜组织中的TRAP阳性细胞百分 数呈正相关（十关系数r—0．442，P＝0．043）。 结论： （l）AS患者组滑膜组织中OPG表达水平明显高于健康对照组 （P＜0刀01），而＊A、＊A滑膜组织中未见＊PG表达，说明＊PG的 高水平表达是滑膜组织对炎症反应／关节破坏所特有的表现，OPG 的局部表达是维持AS关节骨代谢稳定的重要因素，这可能是大多 数AS患者外周关节受累预后好于RA的原因之一。 （2）AS患者组滑膜软骨交界区中OPG表达量显著减少可能是 4 军医进修学院博士学位论文RANKL10PG在羹盅性存柱 周关节骨质玻坏病 制中的作用 导致关节骨质破坏的重要原因，提示关节局部应用 O P G治疗有 l。J能 改善受累关节的骨质破坏状况。 （3）AS患者组受累关节滑膜组织中RANKL表达量明显Ifti十木 出现关节破坏的AS患者，其表达量与关节骨质破坏程度密切川关， 说明RANKL在AS患者骨质破坏病理机制中起重要作用，AS思K 滑膜组织中RANKL表达模式与RA相似，提示AS思者骨质破坏的 病理机制可能与RA类似。 （4） 炎性关节滑膜组织CD68阳性细胞及TRAP阳性细胞数＿量 增加为破骨细胞的生成提供了细胞数量基础，这些均是RANKL过 度表达的结果。RANKL 表达与骨质破坏的密切相关提示抑制 RANKL活性就可能有效阻断破骨细胞前体细胞向破骨细胞的转化， 达到对炎性关节疾病的骨质破坏的治疗。