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多不饱和脂肪酸对高脂诱导大鼠胰岛素抵抗的干预作用及其机制研究

柳红芳  
【摘要】:胰岛素抵抗(Insulin Resistance、IR)是2型糖尿病的重要特征,系指机体靶组织对胰岛素(Ins)的反应性降低,导致相同量的Ins产生的生物效应低于正常,机体为克服IR常伴有代偿性的高胰岛素血症。 IR的发生是一个复杂的机制,可表现为受体前水平、受体水平和受体后水平。随着糖脂病(diabetes millipidus)理论的提出,认为脂代谢紊乱在2型糖尿病的发病中起着重要的作用,其中游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)之间的关系备受关注。然而FFA引起IR的机制仍未明了。本课题对于Wistar大鼠在摄入热卡相同的情况下,观察增加多不饱和脂肪酸对高脂诱导胰岛素抵抗发生的干预作用及发生机理。研究分以下五部分: 一、多不饱和脂肪酸对高脂诱导大鼠胰岛素抵抗干预作用的研究 目的:观察多不饱和脂肪酸对高脂诱导大鼠胰岛素抵抗是否有干预作用。 方法:将75只雄性Wistar大鼠分为5组,即对照组、高脂组、盐酸吡格列酮组、n-3脂肪酸组和n-6脂肪酸组。其中高脂组喂饲的饲料中饱和脂肪酸提供58.8%的热卡。n-3脂肪酸组喂饲的饲料为高脂饲料组中饱和脂肪酸提供热量的20%由二十碳五烯酸乙酯(EPA-E)和二十二碳六烯酸乙酯(DHA-E)所代替。n-6脂肪酸组喂饲的饲料为高脂饲料中饱和脂肪酸提供热量的20%则由豆油中C18:2代替。豆油中n-6脂肪酸(C18:2)的含量用气相质谱联用(GC-MS)法测定。盐酸吡格列酮组在喂饲高脂饲料的同时灌给盐酸吡格列酮片10mg/kg/天,各组均喂养11周后处死。观察各组动物每天饲料摄入重量并计算能量,逐一观察大鼠体重、内脏脂肪相对含量、空腹血糖(FBG)、非空腹血糖和糖负荷30min、60min和120min血糖、糖耐量试验中葡萄糖曲线下面积、皮下注射胰岛素后40min、90min、120min血糖和胰岛素耐量试验中葡萄糖曲线下面积、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数、血清胆固醇和甘油三酯等生化指标。 结果:各组平均每天摄入饲料重量无明显差别。高脂组、盐酸吡格列酮组、n-3脂肪酸组和n-6脂肪酸组之间平均每天摄入饲料能量无明显差别,但均比正常对照组升高(P均<0.01)。 高脂组大鼠从第4周开始体重较正常对照组明显升高,并持续到第10周(P<0.05或 解放军总医院 军医进修学院博士后出站报告 0.01)。空腹血糖和糖负荷30耐n、6 omin和1 2 ofnin血糖、糖耐量试验中葡萄糖曲线下面积、 皮下注射胰岛素后4omin、gomin、12Omin血糖和胰岛素耐量试验中葡萄糖曲线下面积、血 清胰岛素、胰岛素抵抗指数、血清胆固醇和甘油三醋含量也均较正常对照组明显升高(P 0.01或0.001)。高脂组大鼠非空腹血糖、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇与正 常对照组比较无明显差异(P0.05)。 盐酸毗格列酮组第2一4周体重较高脂组明显增加(P0.05),其他各周体重虽较高脂组 有所提高,但无统计学意义。从第1周开始一直到第10周其体重均较正常对照组明显升高 (P0.05或0.01)。体内脂肪相对含量、空腹血糖、糖负荷3omin、60min和120min血糖 和糖耐量试验中葡萄糖曲线下面积、皮下注射胰岛素后40、90和120min血糖和胰岛素耐量 试验中葡萄糖曲线下面积、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数、血清胆固醇、甘油三醋含量均较 高脂组明显降低(P0.叨1或。.01)o n一6脂肪酸组第1一10周体重均较高脂组明显减轻(P0.05或0.01),体内脂肪相对含 量与高脂组无明显差异(P.05);但较n一3脂肪酸组明显升高(P0.叨1)。n一6脂肪酸组 空腹血糖、糖负荷后30min血糖及葡萄糖曲线下面积、皮下注射胰岛素后40min、90min血 糖、血清胰岛素、胆固醇、甘油三醋、低密度脂蛋白胆固醇含量、胰岛素抵抗指数和皮下注 射胰岛素后葡萄糖曲线下面积均比高脂组明显下降(P0 .001,P0 .01或P0 .05)o 与n一3脂肪酸组比较,n一6脂肪酸组糖负荷30min血糖、6 omin血糖、血清胰岛素水平、 胰岛素抵抗指数、胆固醇、甘油三醋、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量均明 显升高(P0.05或0.01或0.001)。 二、多不饱和脂肪酸对高脂诱导大鼠血清游离脂肪酸和瘦素水平的影响 目的:探讨多不饱和脂肪酸对高脂诱导胰岛素抵抗大鼠血清游离脂肪酸和瘦素水平的影 响。 方法:实验动物及分组饲养同前。各组均喂养11周后处死,腹主动脉取血。采用GC一MS 法测定血清游离脂肪酸谱,采用放免法测定血清瘦素水平。 结果:高脂组、盐酸毗格列酮组、n一3脂肪酸组和n一6脂肪酸组大鼠血清瘦素均较正常 对照组显著升高(P0.001)。盐酸咄格列酮组、n一3脂肪酸组血清瘦素水平与高脂组比无 明显差异,n一6脂肪酸组较高脂组及n一3脂肪酸组均显著升高(P均0 .01)。 高脂组大鼠血清游离脂肪酸谱中18烷酸(C18:0)和饱和脂肪酸比正常对照组明显升 高(P0.001,P0.01);18碳2烯酸、18碳3烯酸、20碳4烯酸和不饱和脂肪酸明显下降 4 解放军总医院 军医进修学院博士后出站报告 (P0 .01,P0.05,P0.05,P0.05,)。


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