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骨髓间质干细胞移植对单纯收缩期高血压大鼠主动脉重构及靶器官保护的实验研究

孙晓楠  
【摘要】:目的:通过对骨髓间质干细胞移植对单纯收缩期高血压和自发性高血压大鼠主动脉、心脏及肾脏的结构及功能影响的研究,探讨MSCs对高血压造成的大动脉顺应性降低、靶器官损害是否具有改善作用及可能的作用机制,从而为高血压特别是单纯收缩期高血压的治疗提供新的思路。 方法:采用密度离心法分离大鼠长骨间质干细胞并建立稳定的体外培养体系,对所分离细胞进行纯化、鉴定及标记。采用ISH大鼠及SHR作为研究对象,采用左心室直接注射干细胞的方法进行干预移植,4周后检测实验动物有创血压、脉博传导速度、心脏压力-容积变化,评价动脉顺应性及心功能状态。摘取主动脉、心脏及肾脏组织分别进行病理学检查及蛋白分析。采用三联染色法分析组织中弹性纤维、胶原纤维比例;采用天狼猩红染色后用偏振光显微镜检测动脉壁中Ⅰ、Ⅲ型胶原的水平及比例变化,Yon Kossa染色分析动脉钙化程度。采用免疫组织化学的方法检测动脉壁中血红素加氧酶,纤维粘连蛋白的表达水平。应用蛋白免疫印迹法检测不同组织中骨桥蛋白的表达水平。采用原子吸收光谱法测定钙化组织中钙含量。 结果:1、MSCs对主动脉的影响:ISH大鼠接受MSCs干预后动脉壁中弹力纤维的绝对含量与对照组相比没有达到统计学显著性;而两组间弹力/胶原纤维比值存在统计学差异,MSCs干预高于对照组(P0.01)。细胞外基质成分比例发生变化的同时还伴有基质形态及排列的变化,MSCs干预组弹力纤维保持固有形状,与胶原纤维结合紧密。MSCs植入促进局部动脉组织中血红素加氧酶及纤维粘连蛋白的表达(P0.05)。MSCs通过影响动脉壁中骨桥蛋白表达水平来拮抗主动脉钙化的发生,降低组织局部钙含量(P0.01)。上述动脉结构的改变伴有动脉顺应性的改变。MSCs干预组动物脉搏波传导速度为178.6526±18.54cm/ms,明显低于对照组(264.8546±25.3510),这种变化具有统计学意义(P0.01)。但SHR效果不明显。2、MSCs对心脏的影响:MSCs


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