乙型肝炎患者CD4～+CD25～+调节性T细胞特点和肝病进展相关性研究

【摘要】：乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是一种不直接引起细胞破坏的嗜肝DNA病毒,可以导致慢性肝炎、肝硬化、肝癌。全世界每年有超过350万人感染HBV,约有10%的成年感染者和90%的儿童感染者发展为慢性感染,每年有100-200万人死于HBV感染导致的肝硬化、肝癌等。仅中国就有HBV携带者1.3亿,每年有50万人死于HBV感染导致的肝癌和晚期肝硬化。而HBV感染导致T细胞免疫耐受的确切机制还不清楚。 近年研究认为,CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+T regulatory cell,Treg)在维持机体针对自身和外来抗原的免疫耐受中发挥重要作用。已经有证据显示,在人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)和丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HcV)感染患者中,Treg可以下调HIV或者HCV特异性的T细胞反应,从而促进病毒持续感染。也有报道认为Treg与HBV感染慢性化有关。但是关于慢性HBV感染者Treg频率是否增加以及与病毒复制的关系依然存在争论。而且目前缺乏对急性乙型肝炎(acute hepatitis B,AHB)和慢性重型乙型肝炎(chronic severe hepatitis B,CSHB)患者外周血Treg特点的了解,对Treg在肝脏原位的浸润特点也认识很少。 为了了解上述未知的情况,我们研究了121名不同HBV感染状态患者(包括16名AHB患者,76名CHB患者,29名CSHB患者)外周血和肝脏Treg频率及其与感染状态之间的关系;鉴定了Treg表型;探讨了CHB患者外周血Treg频率与病毒复制的关系;对急慢性乙型肝炎患者外周血Treg的功能进行了分析;并对13例CHB患者和9例CSHB患者肝组织标本进行Treg原位免疫组化染色,不仅观察了Treg在肝脏原位的浸润特点,而且分析了与肝脏原位其他免疫细胞之间的关系。 本研究结果发现:1)通过荧光标记抗体染色后,用流式细胞仪检测CSHB患者外周血和肝脏浸润的Treg细胞频率显著升高,免疫组化染色显示CSHB患者肝脏原位叉状头/翅膀状螺旋转录因子(forkhead/winged helix