收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

TIMP-1通过炎症途径促进衰老相关肾脏纤维化的机制研究

张雪光  
【摘要】:背景和目的:肾脏器官衰老的形态学特征是局灶节段性肾小球硬化、肾小管萎缩和间质纤维化。细胞外基质(ECM)积聚是肾脏纤维化的最终途径。基质金属蛋白酶及其组织抑制物系统(MMPs/TIMPs)是调控ECM降解的主要酶系。肾脏器官衰老过程中TIMP-1表达上调引起MMPs/TIMPs失衡可导致ECM积聚,TIMP-1是否还能够通过其它途径促进肾脏器官衰老进程是人们关注的热点。研究表明某些炎性介质,如细胞间粘附分子-1(ICAM-1),也是MMPs的作用底物,提示TIMP-1可能通过影响炎症而促进衰老相关的肾脏纤维化。本研究以ICAM-1为切入点,观察人TIMP-1转基因小鼠肾组织内随增龄出现的炎症反应变化,并研究正、反义人TIMP-1基因转染对人近端肾小管上皮细胞ICAM-1表达的影响,探讨TIMP-1对肾脏器官衰老进程的影响机制。 方法:留取3、12、24月龄人TIMP-1转基因小鼠(每组n=8)和野生型小鼠(每组n=8)肾组织和血尿标本。检测血肌酐和尿白蛋白排泄率;石蜡切片行PAS染色;间接免疫荧光法检测肾组织内F4/80(小鼠巨噬细胞标志物)阳性细胞数;Northern Blot、Western Blot方法检测肾组织内TIMP-1、TIMP-2、MMP-9、MMP-2、ICAM-1、转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅲ型胶原和Ⅳ型胶原mRNA及蛋白质表达;明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性。反向酶谱法检测TIMP-1的活性。将正义和反义人TIMP-1重组表达载体转染至人近端肾小管上皮细胞(HKC)中,经10~(-7)mol/L血管紧张素Ⅱ刺激24小时;Northern Blot、Western Blot方法检测TIMP-1、TIMP-2、MMP-2、MMP-9和ICAM-1的mRNA和蛋白质表达;Western Blot检测培养上清中可溶性ICAM-1(sICAM-1)的表达;间接免疫荧光法检测各组细胞ICAM-1的表达;免疫共沉淀法检测明胶酶和ICAM-1之间的相互作用;明胶酶谱和反向酶谱分别检测培养上清中明胶酶和TIMP-1的活性。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 ;Effect of Atorvastatin on Serum MMP-2,MMP-9 and TIMP-1 in Rabbits with Chronic Heart Failure[J];Journal of Nanjing Medical University;2008年06期
2 卢晓梅,陈琦,温浩,郑莉,任加强,朱虹光;金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)的克隆与序列分析[J];新疆医科大学学报;2001年04期
3 ;Methodologic research on TIMP-1,TIMP-2 detection as a new diagnostic index for hepatic fibrosis and its significance[J];World Journal of Gastroenterology;2002年02期
4 周梦云;范磊;董宁征;沈飞;阮长耿;;TIMP-4真核表达载体的构建及其作用机制的研究[J];中国血液流变学杂志;2007年02期
5 吴永凯;刘永煜;;肿瘤抑制因子TIMP2在肺癌组织中的表达及其临床意义[J];肿瘤学杂志;2014年06期
6 魏军平,郭力,林兰;糖微康对糖尿病大鼠肾皮质TIMP-1表达的影响[J];中医药学刊;2003年11期
7 姜强,张苏展,彭佳萍,王旭林;Preparation and in vitro studies of microencapsulated cells releasing human tissue inhibitor of metalloproteinase-2[J];Journal of Zhejiang University Science;2005年09期
8 张雪光;陈香美;洪权;尚希瑶;师锁柱;尹忠;蔡广研;;人TIMP-1转基因小鼠随增龄肾组织炎症反应变化的意义[J];中华老年医学杂志;2006年12期
9 尹忠;张雪光;洪权;吕杨;师锁柱;陈香美;;人TIMP-1转基因小鼠随增龄肾组织内血管生成的变化及意义[J];中国老年学杂志;2007年13期
10 刘喜民;刘红敏;;阳离子脂质体介导TIMP-3基因对兔血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年12期
11 冯笑山;高社干;周博;刘德纯;徐家云;;食管癌中医辨证分型与TIMP-2表达的关系[J];河南中医学院学报;2009年03期
12 陈沅然;沈波;李瑜元;;TIMP-3对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移的影响[J];广东医学;2014年01期
13 关立华;魏力;张淑兰;;MMP-26和TIMP-4在人正常月经周期中的表达[J];现代妇产科进展;2006年11期
14 齐云飞;牟英君;裴丽霞;;MMP-9及TIMP-1在恶性外周神经鞘膜瘤中的表达及意义[J];四川解剖学杂志;2007年03期
15 邵彬;聂青和;王平忠;苟艳子;杨洁;;TIMP-1 ELISA检测方法条件的优化研究[J];胃肠病学和肝病学杂志;2007年06期
16 贾莹;王永;黎敏;张宗平;;压应力环境下人牙周膜成纤维细胞中MMP-1和TIMP-1的表达及意义[J];山东医药;2008年14期
17 孔杰;马斌;胡有谷;陈伯华;;人正常和退变腰椎间盘中TIMP_1的表达及其意义[J];青岛大学医学院学报;2008年04期
18 李晋;白玉;姜妙娜;贾玉杰;;肝复康对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-1表达的影响[J];遵义医学院学报;2009年06期
19 韩建国;王丽;韩斐斐;丁志江;;人类牙周膜组织中MMP-2及TIMP-2的比较研究[J];口腔医学研究;2010年01期
20 李毓雯;朱传龙;高人焘;潘家华;;非酒精性脂肪性肝病儿童血清TIMP-1和TIMP-2检测及临床意义[J];中国当代儿科杂志;2010年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 ;Study of TIMP-2 Gene Over-expression Inhibiting the Invasiveness of Ameloblastoma cells in vitro[A];中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会换届选举暨第四届全国老年口腔医学学术研讨会论文汇编[C];2008年
2 梁清华;汤天凤;罗徐;;痹肿消汤对活动期RA患者血清MMP-3及TIMP-1的影响[A];全国中西医结合强直性脊柱炎专题研讨会论文汇编[C];2007年
3 yuejie yang;;Effect of IL-10 on expression of CTGF、TIMP-1 in Hepatic Stellate Cells mediated by TGFβ1[A];中华医学会第十六次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2013年
4 ;Study of TIMP-2 Gene Over-expression Inhibiting the Invasiveness of Ameloblastoma Xenografts on CAM[A];中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会换届选举暨第四届全国老年口腔医学学术研讨会论文汇编[C];2008年
5 卢晓梅;陈琦;温浩;郑莉;任加强;朱虹光;;金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)的克隆与序列分析[A];第七届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2001年
6 王虹;曾位森;陈金华;邹耀东;刘丹;杨艳妮;;组织金属蛋白抑制因子-1(TIMP-1)单克隆抗体的制备及ELISA检测试剂盒的研制[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年
7 薛博瑜;李燚光;;紫七软肝片对实验性大鼠肝纤维化模型TGF-β_1、TIMP-1的影响[A];中华中医药学会第十三届内科肝胆病学术会议论文汇编[C];2008年
8 姜艳;罗小良;靳路远;谢晓莉;;大蒜素对人牙周膜成纤维细胞MMP-1和TIMP-1表达的影响[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
9 梁清华;汤天凤;罗徐;熊新贵;陈疆;;痹肿消汤对活动期类风湿关节炎患者血清MMP-3及TIMP-1的影响[A];中国中西医结合学会第五届基础理论研究专业委员会学术研讨会论文集[C];2006年
10 杨青;王红星;赵云阁;林海燕;张恒;王红梅;Qing-Xiang Amy Sang;祝诚;;TIMP-4在恒河猴妊娠早期子宫和胎盘中的表达[A];第十届全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李明皓;重组腺相关Ⅱ型病毒介导人TIMP1基因抑制肝癌侵袭和生长的实验研究[D];四川大学;2007年
2 宁豪;TIMP-3对树突状细胞免疫功能的影响及其机制的研究[D];山东大学;2012年
3 谢宗佑;内源和外源性TIMP-1基因表达对大肠癌细胞侵袭与转移特性的影响[D];天津医科大学;2004年
4 张颖;携带TIMP-3基因的重组腺病毒对宫颈癌治疗的体内外实验研究[D];中国协和医科大学;2005年
5 陈俊香;TIMP-1通过PTEN途径影响衰老相关肾脏微血管生成障碍的机制研究[D];中南大学;2009年
6 张雪光;TIMP-1通过炎症途径促进衰老相关肾脏纤维化的机制研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2006年
7 李鹏;CCNL1和TIMP1基因对人乳腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响[D];吉林大学;2012年
8 吴永凯;研究两个候选肿瘤抑制因子TIMP2、Decorin在肺癌组织中的表达和血浆蛋白水平的临床意义[D];北京协和医学院;2012年
9 林洪丽;人TIMP-1基因克隆、体外肾脏细胞基因转导、转基因小鼠建立及其肾脏表型变化[D];军医进修学院;2001年
10 刘庆鑫;1.TIMP-1转基因小鼠纯系的建立及体内表达研究 2.TIMP-1转基因小鼠染色体FISH定位[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘泽鑫;香烟提取物对人肺泡Ⅱ型上皮细胞MMP-9、TIMP-1分泌的影响及意义[D];河北医科大学;2014年
2 支伟伟;MMP-9与TIMP-1在肺缺血再灌注损伤大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及意义[D];山西医科大学;2009年
3 罗彬;肺癌MMP—2、MMP—7和TIMP—2表达及意义[D];重庆医科大学;2003年
4 王颖立;促红细胞生成素对光损伤小鼠视网膜色素上皮细胞TIMP-1表达的影响[D];青岛大学;2007年
5 宋之昭;MMP-1、TIMP-1在先天性心脏病室间隔缺损并发肺动脉高压患者肺组织中的表达[D];广西医科大学;2007年
6 刘强;MMP-2和TIMP-1在闭角型青光眼患者房水中的定量研究[D];安徽医科大学;2014年
7 韩亚莉;糖尿病大鼠肾脏中MMP-2、TIMP-2表达变化及虫草菌丝干预作用研究[D];山东大学;2008年
8 刘容锐;TIMP-1短发夹式RNA体内基因转导及来氟米特对大鼠糖尿病肾病的影响[D];大连医科大学;2008年
9 张启霞;TIMP-1在大鼠心肌纤维化中的作用及与细胞凋亡的关系[D];吉林大学;2010年
10 郭珊珊;重组人肝再生增强因子对5/6肾切除大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1和Ⅳ型胶原表达的影响[D];河北医科大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978