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高温调节耐药胃癌细胞化疗敏感性的分子机制

彭楠  
【摘要】:背景:多药耐药是造成肿瘤化疗失败的主要原因,研究多药耐药的机制和逆转方法就成为亟待解决的问题。国内外的研究表明肿瘤多药耐药存在多种机制,如药物外排增加、药物在细胞内的重新分布、凋亡信号转导途径改变、细胞内外环境改变等,并涉及到多个耐药相关分子,包括P-gp、MRP、GST、LRP、TOPO—Ⅱ等。现在比较公认的两种多药耐药逆转剂维拉帕米和环孢菌素A,由于毒副作用大,限制了在临床的应用。肿瘤热疗在近十几年发展迅速,是一种无创或微创技术,在临床上发现与放、化疗有增敏作用,十分有必要进一步探讨其与多药耐药性的关系。 目的:观察43℃高温对人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞多药耐药的影响,高温对加用化疗药物ADM、CDDP、5-FU、TAX时逆转SGC7901/ADM细胞多药耐药的分子机制。 材料和方法:选用人胃癌耐药细胞株SGC7901/ADM和对照的人胃癌敏感细胞SGC7901株。采用MTT试验、RT-PCR法、Western blot法、免疫细胞化学染色、Rho123外排试验、TUNEL法、PI染色流式细胞技术,检测在不同温度和不同药物作用下,人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞和对照的人胃癌敏感SGC7901株细胞的体外药物敏感性,多药耐药相关基因MDR1、P-gp、MRP、LRP在mRNA水平和蛋白水平上的表达,P-gp的外排功能及对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响。 结果:实验发现人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞除了对诱导耐药的ADM耐受,对CDDP、5-Fu、TAX也有交叉耐药。高温43℃可降低人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞的生存率,部分逆转细胞耐药。在人胃癌敏感株SGC7901细胞中未检出MDR1、PGP、MRP、LRP基因的mRNA,在人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞中检出MDR1、P-gp、MRP的mRNA,未检出LRP的mRNA。高温43℃可降低人胃癌耐药株SGC7901/ADM细胞及在此温度下合并ADM、CDDP、5


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