收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

血管平滑肌雌激素受体表达与颅内动脉瘤相关性研究

伍刚  
【摘要】: 第一部分:雌激素受体与血管平滑肌细胞表型蛋白在人类颅内动脉瘤上的表达 目的:探讨正常人体动脉血管和颅内动脉瘤的血管平滑肌(Vascular Smooth Muscle Cell,VSMC)雌激素受体(Estrogen Receptors,ERs)表达变化,正常人体动脉与颅内动脉瘤VSMC表型蛋白α平滑肌肌动蛋白(αSmooth Muscle Actin,α-SMA)和结蛋白(Desmin,Des)表达变化及ERs表达变化与VSMC表型蛋白表达变化之间关系。 方法:临床取材非动脉瘤患者手术区颈外动脉分支8例和颅内动脉瘤切除标本18例。标本采用4%多聚甲醛固定,低温OCT包埋,制成5μm切片,HE染色或PI染色观察对照动脉血管和颅内动脉瘤的形态。免疫组织化学法检测对照动脉血管和颅内动脉瘤ERs、α-SMA和Desmin的表达。应用Image-Pro-Plus 6.0软件检测阳性细胞表达水平光密度值(OD值)。实验数据采用SPSS13.0 for Windows统计软件进行方差分析。 结果:动脉瘤瘤壁VSMC细胞排列紊乱,细胞形态变异,部分动脉瘤壁出现玻璃样变性。ERα和ERβ在正常动脉VSMC女性高于男性,并具有显著差异。(T=3.045,P=0.023和T=2.709,P=0.035)。颅内动脉瘤VSMC表达ERα和ERβOD值分别为0.2800±0.0958和0.3512±0.0848,均高于对照动脉血管表达水平(0.1800±0.0258和0.2299±0.0336),具有显著差异(T=3.174,P=0.004和T=3.877,P=0.001)。颅内动脉瘤VSMC表达α-SMA和Desmin的OD值分别为0.1371±0.0469和0.0961±0.0368,均低于对照动脉血管表达水平(0.3780±0.0427和0.3134±0.0581),具有显著差异(T=12.393,P<0.001和T=11.604,P<0.001)。VSMC ERs的表达与α-SMA和Desmin的表达存在相关性。 结论:1.正常人类颈动脉系统血管VSMC ERs的表达水平存在差异,女性高于男性。2.人类颅内动脉瘤VSMC表达ERs水平升高与VSMC表型蛋白表达水平降低呈负相关,可能与颅内动脉瘤的形成有关。 第二部分:雌激素受体与血管平滑肌细胞表型蛋白在人工诱导大鼠颅内动脉瘤上的表达 目的:通过结扎SD大鼠右侧颈总动脉和双侧肾动脉后支诱导动脉瘤模型,探讨大鼠动脉瘤形成过程中VSMC ERs表达情况与α-SMA和Desmin表达情况之间的相关性。 方法:随机挑选雌雄各15只SD大鼠,结扎右侧颈总动脉和双侧肾动脉后支诱导大鼠形成高血压,术后1周饲喂1%盐水。对照组雌雄各6只,正常喂养。6个月后处死大鼠,4%多聚甲醛灌流固定,获得ACA-OA标本。低温OCT包埋,制成5μm切片,HE染色或PI染色观察对照组和高血压诱导组ACA-OA形态。免疫组织化学法检测对照组和高血压诱导组ACA-OA ERs、α-SMA和Desmin的表达。应用Image-Pro-Plus 6.0软件检测染色切片的OD值。实验数据采用SPSS13.0 for Windows统计软件进行统计分析。 结果:高血压诱导组左侧ACA-OA出现早期血管损伤5例和动脉瘤样病理变化10例,右侧ACA-OA无明显病理改变。正常雌性大鼠ACA-OA ERα和ERβ表达水平高于雄性大鼠(T=3.757,P=0.004和T=2.552,P=0.029)。高血压诱导组雄性大鼠左侧ACA-OA VSMC ERα和ERβ表达分别为0.2287±0.0573和0.2073±0.0696,均高于正常对照组表达水平(T=2.462,P=0.030和T=2.389,P=0.034)。高血压诱导组雌性大鼠左侧ACA-OA VSMCERα和ERβ表达分别为0.2870±0.0279和0.2621±0.0430,均高于正常对照组表达水平(分别为T=2.441,P=0.033和T=2.292,P=0.043)。高血压诱导组雄性大鼠左侧ACA-OA VSMCα-SMA和Desmin表达分别为0.1958±0.1057和0.1348±0.0430,均低于正常对照组表达水平(分别为T=3.314,P=0.006和T=5.351,P<0.001)。高血压雌性大鼠动脉瘤样变化ACA-OAα-SMA和Desmin表达分别为0.2390±0.1161和0.1474±0.0448,均低于对照组表达水平(分别为T=2.800,P=0.017和T=4.958,P<0.001)。雄性大鼠ACA-OA早期动脉损伤ERα和ERβ表达水平为0.1554±0.0412和0.10944±0.0327,与对照组相比无显著差异(T=0.098,P=0.925和T=0.443,P=0.673)。雌性大鼠ACA-OA早期动脉损伤ERα和ERβ表达水平分别为0.2392±0.0447和0.1920±0.0372与对照组相比无显著差异(T=0.225,P=0.829和T=0.299,P=0.773)。本实验大鼠VSMC ERs表达与VSMC表型蛋白之间存在相关性。 结论:1.高血压诱导大鼠动脉瘤模型可以观察颅内动脉瘤病理演化过程。2.在大鼠颅内动脉瘤形成过程中,VSMC从收缩型向合成型转变与雌激素受体表达水平升高有关。3.Desmin表达水平降低可能是动脉血管损伤早期指征,可能预示动脉瘤形成。 第三部分:雌激素受体α、β基因多态性与颅内动脉瘤形成的关系 目的:研究ERα和ERβ基因限制性片段长度多态性(Restriction fragmentlength polymorphism,RFLP)与颅内动脉瘤关系。 方法:2006年2月至2006年11月在解放军总医院神经外科住院患者中选取颅内动脉瘤患者55例,非动脉瘤患者66例作为对照组。平均年龄分别为46.62±L17.62岁和47.85±12.96岁。采集静脉血5ml,提取基因组DNA,PCR扩增ERα第1内含子、ERβ第5外显子和第8外显子片段。扩增片段分别进行限制性内切酶切,ERα第1内含子限制性内切酶为PvuⅡ和XbaⅠ,ERβ第等5外显子为RsaⅠ,第8外显子为AluⅠ。酶切片段,代表多态性位点的基因型,2%凝胶电泳分析条带。实验数据采用SPSS13.0 for Windows统计软件进行统计分析。 结果:ERα第1内含子扩增片段长度为1.3kbp,ERβ第5外显子片段和第8外显子片段长度分别为156bp和307bp。PvuⅡRFLP结果显示对照组PP占12.1%,Pp占50.0%,pp占37.9%;颅内动脉瘤组PP占21.8%,Pp占60.0%,pp占18.2%。对照组与颅内动脉瘤组之间有显著差异(χ~2=6.280,P<0.05)。XbaⅠRFLP结果显示对照组XX占1.5%,Xx占36.4%,xx占62.1%;颅内动脉瘤组XX占1.8%,Xx占40.0%,XX占58.2%。对照组与颅内动脉瘤组之间无显著差异(χ~2=0.198,P>0.05)。RsaⅠRFLP结果显示对照组RR占53.0%,Rr占40.9%,rr占6.1%;颅内动脉瘤组RR占32.7%,Rr占63.6%,rr占3.7%。对照组与颅内动脉瘤组之间有显著差异(χ~2=6.203,P<0.05)。AluⅠRFLP结果显示对照组AA占54.5%,Aa占39.4%,aa占6.1%;颅内动脉瘤组AA占45.5%,Aa占49.0%,aa占5.5%。对照组与颅内动脉瘤组之间无显著差异(χ~2=1.155,P>0.05)。 结论:1.ERα第1内含子PvuⅡRFLP和ERβ第5外显子RsaⅠRFLP多态性与颅内动脉瘤形成有关。2.ERα第1内含子PvuⅡ和ERβ第5外显子RsaⅠ位点的RFLP可能与ERs表达能力和蛋白结构变化有关,可能影响颅内动脉瘤的发生。 第四部分:雌激素和他莫昔芬对体外培养大鼠动脉平滑肌细胞的雌激素受体和平滑肌细胞表型的影响 目的:探讨17β-雌二醇和他莫昔芬对体外培养雌性大鼠胸主动脉VSMCERs和VSMC表型的影响。 方法:体外培养大鼠胸主动脉VSMC。实验分为17β雌二醇E_2(1)10~(-9)M、E_2(2)10~(-8)M和E_2(3)10~(-7)M;TAM(1)10~(-8)M、TAM(2)10~(-7)M和TAM(3)10~(-6)M;TAM10~(-6)M+E_2(3)10~(-7)M组;CON组。作用24h提取总RNA,RT-PCR分析ERα、ERβ、α-SMA和OPN mRNA片段相对浓度。 结果:E_2(1)、E_2(2)和E_2(3)组均促进ERα和ERβ的表达(F=29.973,P<0.001和F=66.186,P<0.001),而各浓度的TAM不影响VSMC ERα和ERβ表达水平,但是10~(-6)M TAM可以阻断10~(-7)M的17β-雌二醇促进ERα和ERβ表达作用。E_2(1)、E_2(2)和E_2(3)组均可促进α-SMA的表达(F=173.836,P<0.001),并可抑制OPN的表达(F=10.243,P=0.004)。而各浓度TAM不影响VSMCα-SMA和OPN的表达,并且10~(-7)M的17β-雌二醇促进α-SMA和抑制OPN表达作用可被10~(-6)M的TAM阻断。 结论:1.雌激素可以促进体外培养的VSMC表达ERα和ERβ增加,同时促进体外培养VSMC由合成型向收缩型转变。2.受体表达升高和VSMC表 型转化过程是雌激素依赖的,可被TAM阻断。3.ERs的表达上调促进了雌激素对VSMC表型转化的调节作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 邓志刚;高永中;张猛;丁建军;伍健明;;颅内动脉瘤雌激素受体与血管平滑肌细胞表型蛋白的表达[J];江西中医学院学报;2008年04期
2 唐燕,陈锡昌,周新华,宋健;雌激素受体在大鼠血管平滑肌细胞中的表达及其调控[J];解剖学杂志;2004年03期
3 李群锋;;雌激素受体对血管平滑肌细胞早衰的影响[J];山东大学学报(医学版);2011年04期
4 金玉华;人类血管平滑肌细胞存在雌激素受体[J];国外医学.心血管疾病分册;1995年02期
5 胡国勇;刘应才;;雌激素激活血管平滑肌细胞钙激活钾通道的非基因组机制研究进展[J];医学综述;2008年23期
6 迟海本;翟宝进;焦德让;;颅内动脉瘤与MAPK信号传导通路[J];国际神经病学神经外科学杂志;2010年02期
7 余永佳;黄玮;吴中学;;一氧化氮及其合酶与颅内动脉瘤[J];中国脑血管病杂志;2006年02期
8 葛明旭;庞琦;栾立明;王汉斌;赵光宇;许尚臣;;颅内动脉瘤信号转导相关基因的研究[J];山东大学学报(医学版);2006年10期
9 朱刚;陈志;缪洪平;王宪荣;;颅内动脉瘤外科治疗及研究进展[J];实用医院临床杂志;2008年02期
10 谢景;李丽娟;晏咏朗;谢静;王树人;;地西他滨对体外培养大鼠的血管平滑肌细胞ERα基因启动子甲基化状态及mRNA表达的影响[J];华西药学杂志;2009年03期
11 郭付有;宋来君;郭予大;游潮;;大鼠颅内动脉瘤模型的建立[J];中国脑血管病杂志;2006年09期
12 葛志强;刘荣;;性激素对心血管的直接作用[J];国外医学.老年医学分册;1997年05期
13 ;激素[J];国外科技资料目录(医药卫生);2002年06期
14 张政威;;大脑中动脉动脉瘤一例报告[J];天津医药;1964年12期
15 江自强;;颅内动脉瘤现代诊疗技术[J];现代诊断与治疗;1992年04期
16 刘承基;颅内动脉瘤的常规手术会造成脑损伤吗?[J];中国微侵袭神经外科杂志;1997年01期
17 魏民,赵继明,刘洪;经股动脉栓塞治疗颅内动脉瘤的护理体会[J];山东医药;1999年19期
18 徐如祥,段传志,田喜光,李铁林;开颅手术处理颅内动脉瘤的初步报告[J];解剖学研究;1999年02期
19 严琪,李玉保,杨志敏,田芳镇;10例颅内动脉瘤的显微手术治疗[J];云南医药;1999年04期
20 赵卫,庞瑞麟,孙学进,李莉媛,后嘉麟,黄建强,向述天,姜永能,胡正琴;颅内动脉瘤微导管栓塞治疗的并发症及其防治[J];云南医药;2000年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 叶锋;刘翼;游潮;;颅内动脉瘤壁雌激素受体的表达及临床意义[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年
2 周选民;徐霖;李小力;;3D DSA与常规DSA在颅内动脉瘤诊断中的对比研究[A];湖北省抗癌协会肿瘤介入学专业委员会成立大会暨第一次肿瘤介入学术大会论文汇编[C];2009年
3 于丽丽;戴敏;;急性颅内动脉瘤破裂出血的围术期护理体会[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年
4 祝向东;周峰;周景义;应广宇;许景;陈高;张建民;;儿童颅内动脉瘤6例分析[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年
5 孙军;陆川;陈献东;蔡建勇;陈茂华;巴华君;林建虎;何学雄;林震旦;;颅内动脉瘤的自然发生史认识[A];2010中国医师协会中西医结合医师大会摘要集[C];2010年
6 毛海英;陈志仁;梁妍;方昊;吴祥才;佟影;;MRA在颅内动脉瘤诊断中的临床价值——与CTA的对比研究[A];中华医学会第十三届全国放射学大会论文汇编(下册)[C];2006年
7 李春华;;旋转DSA技术在诊断颅内动脉瘤中的应用[A];中华医学会第十三届全国放射学大会论文汇编(下册)[C];2006年
8 孙堂胜;魏世辉;武琛;;颅内动脉瘤与眼部改变的关系[A];中国眼底病论坛·全国眼底病专题学术研讨会论文汇编[C];2008年
9 孙堂胜;魏世辉;武琛;;伴有眼部症状的颅内动脉瘤初探[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
10 李琦;温进坤;韩梅;;黄芪、当归对血管平滑肌细胞表型标志基因表达和细胞增殖的影响[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 伍刚;血管平滑肌雌激素受体表达与颅内动脉瘤相关性研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2007年
2 苏军凯;NR2B参与雌激素介导心理应激内脏高敏感的机制研究[D];第二军医大学;2007年
3 赵珩;倍美力对去卵巢痴呆模型大鼠脑保护作用相关分子机制的研究[D];吉林大学;2008年
4 潘峰;人牙周膜干细胞雌激素受体的表达及雌激素对细胞骨分化能力影响的研究[D];第四军医大学;2008年
5 姚婕;白血病中雌激素受体启动子CpG岛甲基化的实验研究[D];第三军医大学;2009年
6 田兴贵;性激素受体在绵羊性腺和肾上腺中的表达[D];中国农业大学;2005年
7 刘佳利;雌激素、雄激素对鸡胚背根神经节和垂体发育的作用及相关机制的研究[D];中国农业大学;2005年
8 Tariq AL Ali;雌激素和葛根素预防和治疗大鼠高Hcy血症的实验研究[D];天津医科大学;2006年
9 于世宾;雌激素及其受体在颞下颌关节中的分布及其生理病理意义的初步研究[D];第四军医大学;2006年
10 周艳;乳腺癌ERβ表达的临床意义及其与他莫昔芬治疗耐药相关意义的初步研究[D];第三军医大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张兴华;介入栓塞治疗80例颅内动脉瘤的疗效与经验[D];中国医科大学;2010年
2 崔景余;颅内动脉瘤51例显微手术治疗的临床体会[D];中国医科大学;2010年
3 吕丙波;颅内动脉瘤术前手术时机选择及术中电生理监测初探[D];苏州大学;2010年
4 温玉东;弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤短中期复发的临床研究[D];安徽医科大学;2011年
5 柯锐钿;颅内动脉瘤的多层螺旋CT血管成像临床研究[D];汕头大学;2010年
6 王双全;雌激素缺乏对大鼠颅内动脉瘤形成影响的实验研究[D];南方医科大学;2010年
7 赵勇;手术治疗Hunt&HessⅣ~Ⅴ级颅内动脉瘤疗效分析[D];河北医科大学;2010年
8 凌峻;Th17免疫应答参与颅内动脉瘤形成的相关性研究[D];南昌大学;2010年
9 何宗泽;NF-κB和MMP-9在颅内动脉瘤中的表达及相关性研究[D];遵义医学院;2010年
10 尹龙;血管内皮生长因子在颅内动脉瘤和动静脉畸形中表达的研究[D];天津医科大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 朱凤霞;山铝医院成功治疗颅内动脉瘤[N];淄博日报;2011年
2 刘建民 张永巍 (上海长海医院临床神经医学中心主任、神经外科主任 刘建民);颅内动脉瘤[N];文汇报;2009年
3 第二军医大学长海医院神经外科 杨鹏飞;颅内动脉瘤治疗思路要变?[N];健康报;2009年
4 白毅;用AR值比用瘤体大小衡量破裂风险更有意义[N];中国医药报;2009年
5 庄愉;雌激素保护心血管机理探秘[N];医药经济报;2001年
6 河北大学附属医院 杨凯艳;颅内动脉瘤引发脑出血的“定时炸弹”[N];大众卫生报;2009年
7 黄显斌;外周血细胞内HIV检测新方法[N];中国医药报;2004年
8 ;雌激素与自身免疫性疾病关系密切[N];中国中医药报;2003年
9 ;从α5(Ⅳ)链mRNA突变分析看Alport综合征基因型和表型关系[N];中国医药报;2003年
10 于骅琴;显微外科技术将在新世纪得到更快发展[N];中国中医药报;2002年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978