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北京地区ABO血型系统分子生物学研究与应用

刘长利  
【摘要】: 目的建立ABO血型系统的基因分型诊断方法以及对稀有血型序列分析测定的诊断技术;并将建立的技术方法应用于临床工作中,为临床疑难血型定型及疑难配血提供技术保证和输血安全保障。利用建立的基因分型技术对北京地区部分人群进行ABO基因分型研究,以了解该人群基因分布特点及规律。通过建立的克隆序列测定技术针对典型稀有血型的进行深入研究,探讨我国ABO稀有血型特有的分子基础。方法通过Multiplex-PCR-RFLP技术和PCR-SSP技术建立起稳定的ABO血型基因分型方法,利用该方法开展对北京地区汉族人群ABO基因分型研究工作;利用微流体芯片技术在样品检测方面的优势,将之与ABO血型基因分型技术结合应用,并且将建立的新型分型检测技术应用于临床疑难标本的分型鉴定工作中。建立稳定的ABO基因序列测定诊断技术,利用该技术对临床疑难标本进行分析研究。结果(1)建立了一套完善和稳定的基因分型方法。(2)研究表明A_(102)、O_1、B为北京地区汉族人群中较为常见的等位基因;结果显示,在北京汉族人群中A型以A_(102)为主,占绝对优势;未检测到A_(201)等位基因;发现3例O_2基因样本,提示在该人群中存在O_2基因。(3)建立了利用微流体芯片技术检测ABO血型基因分型的诊断技术。(4)在送检的疑难定型标本中,鉴定出1例较为罕见的含有抗A1抗体的A_(201)病例。(5)鉴定了1例因疾病及治疗原因导致血型抗原减弱,血型鉴定不符病例。(6)建立了ABO基因序列测定技术诊断。(7)发现1例nt700位C→G突变的罕见B(A)~*02标本。结论本项研究首次将微流体芯片技术与ABO血型基因分型方法相结合,建立了一套较为准确和标准的ABO血型基因分型自动诊断系统,并利用该诊断系统为临床血型鉴定及配血工作提供安全、高效的服务。通过研究初步了解了北京地区汉族人群的ABO基因分型规律。建立的ABO稀有血型序列测定诊断技术不仅成为ABO血型确诊的最终保障,而且为ABO稀有血型分子基础的深入研究提供了重要依据。


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