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血必净对脓毒症大鼠凝血功能、肠微循环及肠道屏障的干预

李冰  
【摘要】: 目的 脓毒症时,全身炎性反应激活凝血系统,导致凝血功能障碍,微循环障碍,微血栓形成。本文应用祖国传统中药制剂血必净对脓毒症大鼠凝血、肠微循环及肠屏障功能的干预,探讨其对脓毒症时上述病理改变的干预及预防效果。目的包括: 1.使用盲肠结扎穿孔术建立大鼠脓毒症动物模型,观察血必净对脓毒症大鼠全身炎性反应和凝血功能障碍的干预效果。 2.在体实时观察脓毒症大鼠肠系膜微循环的改变,观测血必净对毛细血管血流动力学改变和微血栓形成的影响作用。 3.观察脓毒症时血必净对肠道粘膜和免疫屏障功能异常的影响。 方法 1.实验动物为SD大鼠150只,雌雄不拘,随机分为3组,即脓毒症组(A组)、血必净干预组(B组)和假手术组(C组),每组50只。A组:行盲肠结扎穿孔术。C组:开腹,暴露盲肠,不行盲肠结扎穿孔术。B组:处理同脓毒症组,术后血必净组大鼠腹腔内给予血必净注射液4ml/kg,1次/12h,共3d。其它两组注射相同体积的生理盐水。制模后于即刻和使用血必净后12h、24h、48h、72h进行颈动脉取血检测炎性因子和凝血功能指标然后将动物活杀,每时间点有效活杀检测的大鼠为10只。 2.在上述时间点取血前,取出回盲部附近的肠系膜,显微镜下观察PMN在肠系膜毛细血管血流动力学改变和微血栓形成情况并录像。 3.在上述时间点取血后,快速取距盲肠约10cm小肠标本一段,10%福尔马林固定,送检病理科,石蜡包埋后切片,光镜下观测肠粘膜病变。免疫组化法测肠粘膜巨噬细胞抗体(Ed-1)。 结果 1.对照组,凝血功能基本正常,同脓毒症组、血必净干预组相比,差异显著。脓毒症组大鼠,24h凝血功能出现异常,48h及72h维持高水平,较24h明显升高;血必净干预组,24h凝血功能出现异常,与脓毒症组无明显差异,48h达高峰,72h未再升高,与脓毒症组有明显差异; 2.对照组,YNF,IL-1,IL-6,IL-8,血清含量较低,同脓毒症组、血必净干预组相比,差异显著。脓毒症组大鼠,TNF,IL-1,IL-6,IL-8,12h开始升高,24h明显升高,48h及72h维持高水平;血必净干预组,TNF,IL-1,IL-6,IL-8,12h开始升高,与脓毒症组无明显差异,48h达高峰,72h未再升高,与脓毒症组差异显著。 3.脓毒症组大鼠,12h肠系膜微循环血流速度明显加快,24h血流速度减缓,PMN附壁明显增多,48h血流淤滞,流速进一步减低,微血栓形成,72h变化不明显,但血流速度加快。血必净组大鼠,12h肠系膜微循环血流速度明显加快,24h血流速度减缓,但与12h相比无明显差异,与脓毒症组相比有明显差异,PMN附壁增多不明显,但与脓毒症组相比有显著差异,48h血流进一步减缓,有微血栓形成,与脓毒症组无明显差异,72h变化不明显,但血流速度加快,与脓毒症组有差异。与对照组相比较,脓毒症组、血必净干预组在上述时间点的变化显著。 4.脓毒症组大鼠,12h肠道粘膜充血水肿,多为基本正常粘膜,即0,1级为主,24h2,3级为主,48h出现4,5级病变;肠粘膜巨噬细胞抗体表达逐渐增多,24h达最高峰,48h开始减少与24h相比较,有显著差异,与72h有明显差异。血必净干预组,12h同脓毒症组,24h多为1,2级病变,48h出现3,4级病变,偶可见5级病变,72h病变基本等同同组48h,但与脓毒症组有差异;肠粘膜巨噬细胞抗体表达量较脓毒症组增多明显,48h与脓毒症组有显著差异。与对照组相比较,有显著差异。 结论 1.血必净可在一定程度上抑制脓毒症时炎性因子的激活,减轻凝血功能障碍的发生,缓解脓毒症的发展。 2.血必净可改善脓毒症时机体微循环功能,减少微血栓。 3.血必净对脓毒症时肠道粘膜机械屏障和免疫屏障具有一定的保护作用。


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