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胃酸和胃内细菌的随龄变化及其与肺部感染关系的探讨

朱鸣  
【摘要】: 目的:研究大鼠胃内pH值的变化与胃及肺部细菌数量变化的关系,观察是否存在大鼠胃内细菌到肺部的逆向定植,以及细菌的生长是否能引起大鼠胃及肺部的炎症反应。比较老龄与非老龄大鼠对胃内pH值升高所致细菌变化的反应。研究人体胃内微生态,人体胃内pH值、胃内细菌数量与年龄、萎缩、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染及其他因素的关系,初步探讨胃内pH值、胃内细菌与肺部感染的关系。 方法:1.Wister大鼠40只,3月龄的非老龄大鼠30只,22月龄的老龄大鼠10只。分为非老龄奥美拉唑组,非老龄柠檬酸组,非老龄对照组和老龄对照组,每组各10只。非老龄奥美拉唑组以奥美拉唑灌胃(15mg/kg/d);非老龄柠檬酸组以相同剂量的奥美拉唑灌胃的同时以柠檬酸(0.1mmol/L)为饮用水;非老龄及老龄大鼠对照组均以等量的生理盐水灌胃。2周后测大鼠胃内pH值,取大鼠胃组织及肺组织做细菌培养,并做胃组织及肺组织病理切片检查。 2.3月龄非老龄Wister大鼠20只,22月龄老龄Wister大鼠12只,各分为2组,老龄、非老龄奥美拉唑组,老龄、非老龄对照组。奥美拉唑组以奥美拉唑灌胃(15mg/kg/d),对照组以等量的生理盐水灌胃。第4d开始,连续10d给大鼠灌饲含质粒pGEX-4T-1-EGFP的大肠杆菌(10mL/kg,1次/d)。第14d测胃内pH值,取胃及肺组织做细菌培养,并做胃及肺组织的病理切片。应用荧光显微镜和质粒酶切电泳鉴定细菌的来源。 3.选择69例患者作为研究对象。其中男性53例、女性16例。年龄≥60岁55例,<60岁14例(男性≥60岁45例,<60岁7例,女性≥60岁10例,<60岁7例)。胃镜下取胃液测胃液pH值,取胃窦及胃体组织,做需氧及厌氧细菌培养,计数胃组织细菌培养数量,16SrRNA法鉴定胃组织细菌。胃镜检查前询问病史,检查术后电话随访患者在胃组织培养前后共半年时间内是否有肺部感染发生。 结果:1.与非老龄对照组大鼠相比,老龄对照组大鼠胃内pH值、胃及肺部细菌数量均无明显差异;与非老龄对照组大鼠及非老龄柠檬酸组大鼠相比,非老龄奥美拉唑组大鼠胃内pH值、胃及肺部细菌数量均有明显差异;非老龄柠檬酸组胃内细菌数量较非老龄对照组大鼠差异明显,但胃内pH值及肺部细菌数量无明显差异;相关性分析显示,大鼠胃内pH值与胃及肺部细菌数量正相关。观察4组大鼠的病理切片,发现胃组织均无明显炎细胞浸润。非老龄对照组、老龄对照组及非老龄柠檬酸组相似,肺组织均有轻度淋巴细胞浸润。非老龄奥美拉唑组30%的大鼠肺部炎症稍重。 2.荧光显微镜下观察大鼠的胃及肺部分离的大肠杆菌,可见明确的绿色荧光。胃和肺部分离出的细菌经质粒酶切电泳鉴定,可见目的条带。非老龄奥美拉唑组大鼠胃内pH值和胃内大肠杆菌数均高于非老龄对照组,肺部大肠杆菌数无统计学差异。老龄奥美拉唑组大鼠胃内pH值及胃和肺部大肠杆菌数均高于老龄对照组。老龄奥美拉唑组大鼠胃内pH值及胃内大肠杆菌数与非老龄奥美拉唑组相比无统计学差异,但肺内大肠杆菌数明显高于非老龄奥美拉唑组;相关性分析显示,大鼠胃内pH值与胃内及肺部大肠杆菌数量正相关。观察4组病理切片,发现胃组织均无明显炎症。非老龄对照组和老龄对照组相似,肺组织中均有轻度淋巴细胞浸润。非老龄奥美拉唑组肺部炎症较老龄奥美拉唑组轻,与对照组差别不明显,老龄奥美拉唑组中50%的大鼠肺部炎症较重。 3.Logistic回归分析结果表明,需氧条件下,人体胃内细菌培养数量随胃内pH值的增高而升高,而与性别、年龄、糖尿病、Hp感染及萎缩性胃炎无关。随胃内pH值升高与糖尿病的加重,胃内厌氧条件下细菌培养数增多,如伴有Hp感染,则胃内厌氧培养细菌数减少。年龄越大,患萎缩性胃炎的几率越大。初步分析人体胃内pH值与性别、年龄、糖尿病、Hp感染及萎缩性胃炎无关。随访66例研究对象中,10例有肺部感染,他们胃内pH值较高或服用了抑酸药物。胃内共分离出细菌69株,为口咽部和胃肠道常见菌群。老年人胃内常见的细菌是:链球菌、大肠埃希菌、奈瑟菌;非老年人胃内常见的细菌是:链球菌和大肠埃希菌。 结论:1.大鼠胃内pH值与胃及肺部细菌数量正相关。随胃内pH值升高,组织学上肺部炎症反应有所增加。 2.经荧光显微镜及质粒酶切电泳,证实大鼠胃内含pGEX-4T-1-EGFP的大肠杆菌可以转移到肺部。老龄奥美拉唑组大鼠肺部的大肠杆菌数高于老龄对照组和非老龄奥美拉唑组,肺部炎症反应也较重。 3.需氧条件下,人体胃内细菌培养的数量与胃内pH值相关。厌氧条件下,细菌培养数与胃内pH值、糖尿病及Hp感染相关。胃内分离的细菌为口咽部和胃肠道常见菌群。老年人胃内常见的细菌是:链球菌、大肠埃希菌、奈瑟菌,非老年人胃内常见的细菌是:链球菌和大肠埃希菌。


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