收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜蛋白质的筛选与鉴定

姚欣  
【摘要】: [背景与目的]肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是常见的功能性肠病,其发病机制尚不清楚。已提出的有胃肠动力异常,内脏敏感性改变,脑-肠相互作用、神经免疫内分泌失调等机制,但什么细胞及分子参与IBS的机制尚不清楚。细胞或器官功能的异常必然有其物质的基础,蛋白质是生命活动的基础,本研究应用蛋白质组学方法,寻找腹泻型IBS(IBS withdiarrhea,IBS-D)患者和正常人结肠黏膜的差异表达蛋白质,旨在筛选出对IBS-D发病起重要作用的蛋白质,揭示IBS-D的分子机制。 [材料与方法]IBS-D患者5例,诊断均符合功能性胃肠病罗马Ⅲ科研诊断标准,健康志愿者5例为对照组。分别在进行结肠镜检查时,直视下于盲肠及乙状结肠粘膜各活检4块;3块立即置于含0.1%苯甲基磺酰氟的冰盐水中洗净,液氮中保存;1块于福尔马林溶液中固定,石蜡包埋。将两部位液氮标本等量混合,提取组织总蛋白后,进行双向凝胶电泳。采用银染法对凝胶进行显色固定,扫描仪获取图像。使用Image Master 2D Elite软件对图像进行分析,筛选出在IBS-D组表达有明显差异的蛋白质点;选取显示清晰的10个点进行质谱鉴定;应用Western blot和免疫组织化学方法对其中一种蛋白质进行验证。 [结果]健康对照组2-DE图谱得到1504±69个蛋白点,IBS-D组显示1356±104个蛋白点,发现Volume值改变=2.0倍以上的点共41个,其中11个点表达上调,30个点表达下调。分别选择其中表达上调及下调明显的5个点,进行质谱鉴定,表达上调的蛋白经鉴定为线粒体ATP合酶d亚基、硫转移酶1A3/1A4、细胞质乙酰辅酶A乙酰基转移酶、硫氧还蛋白和醛脱氢酶2;表达下调的蛋白为免疫球蛋白kappa链(immunoglobulin kappa chain,Ig k)、异丁酰辅酶A脱氢酶、WDR1蛋白、T复合物蛋白1a亚单位和烯醇化酶a。应用Western blot方法对上述5例IBS-D患者和5例健康对照组的结肠黏膜的Ig k和Igλ进行检测,发现两组Ig k存在显著性差异,IBS-D组含量明显低于对照组(P<0.05);Igλ无显著性差异(P>0.05)。对满足罗马Ⅲ科研标准的24例IBS-D患者和19例健康对照的盲肠和乙状结肠黏膜标本的Ig k和Igλ免疫组织化学染色显示,粘膜固有层浆细胞、腺泡间质、小血管壁及上皮基底膜表达Ig k和Igλ;两组Ig k存在显著性差异(P<0.05),IBS-D组表达减弱;Igλ差异不明显。 [结论]IBS-D患者结肠粘膜存在一些蛋白质表达的上调与下调,这些蛋白包括线粒体ATP合酶d亚基、硫转移酶1A3/1A4、细胞质乙酰辅酶A乙酰基转移酶、硫氧还蛋白、醛脱氢酶2、Ig k、异丁酰辅酶A脱氢酶、WDR1蛋白、T复合物蛋白1a亚单位和烯醇化酶a。Ig k在结肠黏膜固有层浆细胞、腺泡间质、小血管壁及上皮基底膜表达,Western blot和免疫组织化学染色均显示Ig k在IBS-D组表达减弱。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 林苏,刘懿,钟良,孙大裕;小肠黏膜下血管瘤病例报道及文献复习[J];中华消化杂志;2004年12期
2 任宏宇,刘俊,宋军;热休克蛋白在肠黏膜上皮的表达[J];中华消化杂志;2005年06期
3 段建华;肠黏膜屏障研究进展[J];实用医学杂志;2004年02期
4 袁志强,彭毅志,李晓鲁,黄跃生,杨宗城;严重烧伤早期肠黏膜组织热休克蛋白70的表达规律[J];中国危重病急救医学;2005年05期
5 夏中元 ,孟庆涛 ,何宇红 ,张帆 ,吴述轩 ,王再平 ,叶刚;参麦对休克复苏时肠黏膜内一氧化氮、丙二醛及钙含量的影响[J];中国现代医学杂志;2003年12期
6 辛春,訾慧;横结肠黏膜下脂肪瘤1例报道[J];辽宁中医学院学报;2005年02期
7 夏中元!430060,郑利民;参附注射液防护肠黏膜缺血再灌注损伤的实验研究[J];中华创伤杂志;2001年04期
8 蔡晨,唐益忠,刘晟,王永杰;肠内免疫营养对烫伤大鼠肠黏膜保护作用的实验研究[J];安徽医科大学学报;2004年06期
9 任万英,李华,赵丽婷;过敏性紫癜在内镜下的胃、肠黏膜改变[J];中华消化杂志;2002年04期
10 严彩霞,张丙宏;一种新型肠黏膜保护剂——肠三叶因子[J];国外医学.儿科学分册;2004年06期
11 李勇,来运刚,邝刚,秦琪瑜,赵群,王力利,杨进强,张金燕;重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜ICAM-1表达与黏膜损伤的关系[J];基础医学与临床;2004年01期
12 赵云,王凤君,王裴,汪仕良;烧伤后肠黏膜细胞外基质与细胞凋亡关系的实验研究[J];中华烧伤杂志;2004年04期
13 郭长青,黄宏春,李继昌,苏英,宁寒冰;肝炎肝硬化自发性腹水感染患者肠黏膜通透性检测[J];郑州大学学报(医学版);2005年01期
14 谈燚,孟海萍,王丽;肠道通透性改变与急性胰腺炎早期手术探查[J];中国普通外科杂志;2003年11期
15 王晓军,孙永华,丁勤学,宋国成,景燕茹,张莉萍,曹原;大鼠烫伤后肠黏膜上调蛋白质组的分离鉴定及其功能分析[J];中华创伤杂志;2004年10期
16 刘蓉,唐方;中药保护肠屏障功能研究概况[J];上海中医药杂志;2004年12期
17 季玉光;腹泻用药要做到四不二保三看[J];解放军健康;2005年06期
18 黄祖雄,叶礼燕,郑智勇,陈新民,任榕娜,童国元;谷氨酰胺对慢性腹泻幼鼠肠黏膜修复的影响[J];中华儿科杂志;2005年05期
19 陈吉,吴国豪;胰高血糖素样肽2与肠道保护[J];中华胃肠外科杂志;2005年06期
20 胡雪玲;溃疡性结肠炎肠黏膜一氧化氮合酶mRNA表达测定及疗效观察[J];现代中西医结合杂志;2002年23期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 彭曦;汪仕良;陶麟辉;王裴;尤忠义;;不同营养支持途径对烧伤大鼠肠黏膜损伤和修复的影响[A];全国烧伤创面处理、感染专题研讨会论文汇编[C];2004年
2 禹滨;杨丽君;;仔猪腹泻与肠黏膜保护[A];2005辽宁省畜牧兽医学会养猪研究会学术年会论文集[C];2005年
3 赵云;王凤君;王裴;陈渝;汪仕良;;重组胰高血糖素样多肽-2对烧伤大鼠肠黏膜的保护作用[A];第五届全国烧伤救治专题研讨会烧伤后脏器损害的临床救治论文汇编[C];2007年
4 宋国栋;王德昌;贾军;马印东;张磊;杨涛;李绪昆;曹荣升;;重组人生长激素对烧伤大鼠肠黏膜结构及细胞凋亡的影响[A];全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(下)[C];2003年
5 李晓宇;何兴祥;;MIF在大肠黏膜癌变和大肠癌肝转移中的表达以及对大肠癌细胞体外侵袭的影响[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
6 王涛;文亮;熊建琼;;乌斯他丁对缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜免疫功能的影响[A];第十一次全国急诊医学学术会议暨中华医学会急诊医学分会成立二十周年庆典论文汇编[C];2006年
7 王巧民;宋继中;贾勇;丁西平;翟志敏;金晓毛;;肠易激综合征患者结肠黏膜T、B细胞变化[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(上册)[C];2007年
8 邹晓防;周国勇;胡森;吕艺;黎君友;盛志勇;;卡巴胆碱对缺血再灌流大鼠肠黏膜组织炎症反应和血流量的影响[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年
9 吴炜烽;吕宾;张烁;;云母对NSAIDs肠黏膜损伤的保护作用的研究[A];第二十次全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2008年
10 索占伟;胡格;刘钟杰;于志强;段慧琴;崔德凤;韩博;穆祥;;大肠杆菌热敏肠毒素对肠黏膜微血管内皮细胞的影响及白头翁素对其保护作用的研究[A];第四届中国畜牧科技论坛论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 顾立立;小檗碱对肠黏膜屏障中上皮紧密连接作用的研究[D];第二军医大学;2011年
2 李晓鲁;HSP70基因转染对烧伤后肠黏膜缺血缺氧性损伤保护作用的实验研究[D];第三军医大学;2003年
3 程君涛;腹内高压对肠黏膜屏障功能的影响及在肠道氧化还原失衡、凋亡中作用的研究[D];第三军医大学;2003年
4 刘圣烜;急性肝内胆汁淤积幼鼠肠黏膜屏障损伤机制及益生菌对其干预的研究[D];华中科技大学;2010年
5 林睿;肠黏膜屏障损伤对自身免疫性肝炎患者枯否细胞免疫调节功能影响的研究[D];天津医科大学;2013年
6 张旋;添加不同营养素的肠内营养对改善脑外伤大鼠肠黏膜屏障功能和多巴胺受体表达的相关性研究[D];福建医科大学;2012年
7 祝胜美;经典原位肝移植围术期监护与处理的临床和基础研究[D];浙江大学;2003年
8 Imran Rashid;由Toll like receptors介导的布拉氏酵母菌和枯草芽孢杆菌B10对肉鸡肠黏膜免疫功能影响的研究[D];浙江大学;2013年
9 刘圣烜;急性肝内胆汁淤积幼鼠肠黏膜屏障损伤机制及益生菌干预的研究[D];华中科技大学;2010年
10 周雯;羊颌下腺表皮生长因子的分离、纯化对胃肠黏膜炎性疾病的治疗作用及其机制探讨[D];浙江大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 范妮;益生菌对肝硬化患者肠黏膜通透性的影响[D];青岛大学;2010年
2 陈莉;限制性输液复苏孕兔失血性休克对肠黏膜屏障功能的影响[D];南方医科大学;2010年
3 刘玉江;膳食纤维对实验性结肠炎大鼠肠黏膜屏障的影响[D];山西医科大学;2010年
4 杨琳娜;伴高脂血症性急性坏死性胰腺炎大鼠的肠道免疫功能及肠粘膜谷氨酰胺代谢改变的实验研究[D];福建医科大学;2009年
5 王新国;肝肺综合征发病机制的有关研究[D];山西医科大学;2005年
6 吴文明;高原缺氧条件下对大鼠肠黏膜屏障损伤机制及其干预的实验研究[D];第四军医大学;2010年
7 李霞;SPV干预下重度创伤—失血性休克大鼠小肠黏膜病理形态学观察[D];河北联合大学;2011年
8 吴鹏;谷氨酰胺对梗阻性黄疸大鼠门静脉阻断后肠黏膜屏障的影响[D];滨州医学院;2010年
9 吴志锋;鱼油对脂多糖刺激仔猪肠道损伤的保护作用[D];武汉工业学院;2011年
10 于卓腾;鸡肠黏膜乳酸菌的分离鉴定及其益生特性研究[D];南京农业大学;2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 保健时报特约专家 樊跃平 吴伟;胃十二指肠溃疡是种心身疾病[N];保健时报;2007年
2 副主任医师 魏开敏;当心便秘诱发直肠溃疡[N];大众卫生报;2006年
3 记者 王璟;中老年人急需护好肠道保护层[N];医药养生保健报;2007年
4 河北农业大学动物科技学院 金东航 顾宪锐;奶牛黏液膜性肠炎咋治[N];河北科技报;2006年
5 常怡勇;治疗小儿冬季腹泻的老药新用[N];农村医药报(汉);2007年
6 李幼生;化疗影响肠屏障功能[N];健康报;2006年
7 陈平;如何防治脱肛[N];中国老年报;2005年
8 肖摩;《胃肠再生复原保健》正式出版[N];健康报;2007年
9 王振坤;人体的肠道防线[N];家庭医生报;2006年
10 山西恒丰强动物药业有限公司技术部 王华听;鸡肠毒综合症的防治[N];中国畜牧兽医报;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978