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重度失血性休克延迟复苏及口服补液对免疫功能影响的实验研究

王瑞晨  
【摘要】: 目的:1.建立Beagle犬40%血容量失血后早期口服补液的动物模型;2.研究延迟复苏对犬40%血容量失血后细胞免疫功能的影响;3.研究早期口服葡萄糖电解质溶液,在预防延迟复苏所致免疫功能障碍中的作用及可能机制。 方法:Beagle犬14只,动物于40%血容量失血实验前1天,实施无菌颈动脉、颈外静脉置管及胃造口置管术。次日,按全身血容量的40%于1/2h放血完毕,随机分为延迟复苏组和口服补液组。延迟复苏组24小时内无治疗;口服补液组于放血后30min经胃输注3倍失血总量的GES液(前8小时输注1/2,后16小时输注1/2)。两组犬于失血后24h开始静脉液体复苏,输注3倍于失血总量乳酸林格液,48h后输注生理需要量。72h处死动物。采集0h、1h、4h、8h、24h、48h、72h的外周静脉血,采用流式细胞分析仪检测外周血淋巴细胞凋亡率、CD3~+/CD4~+和CD3~+/CD8~+T淋巴细胞的百分率,并计算CD4~+/CD8~+比值;ELISA法检测血浆TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和淋巴细胞增值率水平。 结果:1.CD4~+和CD8~+T淋巴细胞比例的变化:伤后两组CD4~+T淋巴细胞百分比均下降,4h降至最低点,延迟复苏组4h较伤前降低(P<0.05),48h、72h低于口服补液组(P<0.05),口服补液组72h较伤前升高(P<0.05);伤后各时间点两组CD8~+T淋巴细胞比例均较伤前升高(P<0.01),延迟复苏组24h、48h、72h显著高于口服补液组(P<0.01);两组的CD4~+/CD8~+比值在伤后各时间点均较伤前降低(P<0.01),延迟复苏组24h、48h和72h低于口服补液组(P<0.01)。2.外周血淋巴细胞凋亡率和增殖率的变化:伤后两组凋亡率均先降低,于4h降至最低值;口服补液组4h较伤前降低(P<0.01),延迟复苏组4h、48h较伤前降低(P<0.05),4h、48h、72h低于口服补液组(P<0.05);40%血容量失血后,延迟复苏组24h淋巴细胞增殖率低于伤前(P<0.05),低于口服补液组(P<0.05)。3.细胞因子的变化:①血浆IFN-γ水平口服补液组1h、4h、48h较伤前降低(P<0.05),延迟复苏组伤后各时间点IFN-γ水平均较伤前降低(P<0.05),8h、24h低于口服补液组(P<0.01)。②口服补液组IL-4水平较伤前无差异(P>0.05),延迟复苏组4h升高至峰值,1h、4h、8h均较伤前升高(P<0.05),1h、24h、48h时间点均高于口服补液组(P<0.05)。③IFN-γ/IL-4比值伤后均逐渐降低,4h降至最低值,两组伤后各时间点均较伤前降低(P<0.05),1h、4h、24h、72h延迟复苏组低于口服补液组(P<0.05)。④IL-10水平均较伤前升高,4h达峰值之后开始降低;口服补液组1h、4h、8h、72h较伤前升高(P<0.05),延迟复苏组1h、4h、8h、48h较伤前升高(P<0.05),但1h、4h、72h均低于口服补液组(P<0.05)。⑤伤后TNF-α均急剧升高,于1h达峰值后降低,8h降至伤前水平;口服补液组伤后1h、4h均较伤前显著升高(P<0.05),延迟复苏组伤后1h、48h、72h均较伤前显著升高(P<0.01),24h、48h、72h均高于口服补液组(P<0.05)。⑥伤后血浆IL-2水平较伤前下降,1h降至最低后缓慢升高;口服补液组1h、4h较伤前降低(P<0.05),延迟复苏组伤后各时间点均较伤前显著降低(P<0.05),1h、4h、8h低于口服补液组(P<0.05)。 结论:1.失血性休克延迟复苏导致T淋巴细胞功能持续处于抑制状态,细胞免疫功能紊乱,Th1和Th2失衡,Th1向Th2漂移;机体全身炎症反应失去控制,促炎/抗炎平衡失衡可能是其重要原因之一;2.早期口服补液可以提高T淋巴细胞增殖能力,改善细胞免疫功能紊乱,减轻Th1/Th2漂移,改善休克后免疫功能抑制状态,这可能与早期口服补液改善失血性休克病情,减轻全身炎症反应,调节促炎/抗炎反应平衡有关。


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