收藏本站
收藏 | 论文排版

偏头痛痛觉机制—电刺激清醒大鼠上矢状窦区硬脑膜后三叉神经核尾侧复合体基因表达谱的实验研究

姜磊  
【摘要】: 目的: 1.观察电刺激清醒大鼠上矢状窦区硬脑膜后三叉神经核尾侧复合体基因表达谱的变化,寻找差异基因; 2.利用实时定量PCR方法对与偏头痛病理生理关系密切的部分差异基因进行验证,探讨偏头痛痛觉发生的可能分子机制; 3.利用western-blot技术对与偏头痛病理生理关系密切的AKAP5基因表达产物在模型中作进一步验证。 方法: 1.使用Affymetrix Cenome Rat 230 2.0寡核苷酸微阵列芯片对电刺激模型大鼠三叉神经核尾侧复合体基因差异表达进行研究。电刺激结束后快速将大鼠断头取出延髓及上颈段(至颈2),抽提RNA,进行芯片杂交,清洗染色,将芯片放入基因芯片扫描仪3000进行扫描,使用GeneChipoperating software(GCOS)对扫描图像进行处理分析,获得数据。使用SAM软件进行处理筛选出差异基因;使用CB-MAS_4.0_生物分子功能注释系统(MAS)把挑选出的差异表达基因进行Pathway和GO的统计分析。 2.采用实时定量PCR实验的方法对差异基因中的10个进行验证,使用生物信息学方法分析差异基因的功能。综合评价偏头痛痛觉的分子机制。 3.体重为250克左右SD大鼠27只,随机分为a对照组(n=4)、b电刺激30分钟组(n=6)、c电刺激60分钟组(n=6)、d电刺激120分钟组(n=5)和e吗啡干预+电刺激120分钟组(n=6),共5组。对照组不予刺激,其余各组电刺激不同时间,各组结束后立即断头取脑,取出延髓及上颈段(至颈2),利用western-blot技术对AKAP5在三叉神经核尾侧复合体中的表达进行研究。 结果: 1.在全基因组31099个转录子(transcripts or probe sets)中,根据detection p-value<0.05为“present”,对照组三叉神经核尾侧复合体共检测到21052.33±194.50个,占总数的67.69%,而电刺激组三叉神经核尾侧复合体共检测到20812.67±130.89个,占总数的66.92%。使用SAM软件分析,根据常规筛选标准:|Score(d)|≥1.5,同时Fold Change≥1.5或Fold Change≤0.67,相对于对照组,电刺激组三叉神经核尾侧复合体转录子表达显著变化的有44个,其中下调28个,上调16个(Changep-value<0.05)。对上述差异基因进行功能分类,差异基因主要涉及维生素A代谢、细胞粘附点、细胞粘附分子、转运活动、电化学电位驱动转运蛋白活动、质膜必需组分、质膜固有组分、三羧酸循环、横纹肌收缩、色氨酸代谢、G蛋白信号、细胞周期、无机阴离子转运、激酶活动、肌动蛋白绑定、信号转导蛋白活动、脂质粘合、阴离子转运、脂肪生成、蛋白折叠、生长、细胞骨架蛋白粘附、酶抑制剂活动、神经系统发育、系统发育、辅酶代谢、细胞外基质、结合、细胞器膜、离子转运、转运蛋白活动、细胞粘附、胞内蛋白转运、细胞质、单价无机阳离子转运、胞外区、金属离子转运、代谢、氧化还原酶活动、线粒体、钠共输送体活动、输送体活动、神经递质转运等信号通路。 2.虽然表达上调或下调的倍数存在差异,但芯片结果与实时定量PCR结果在上调或下调的趋势上基本一致。 3.AKAP5在大鼠延髓及上颈髓中有表达,各组间表达无显著差异。 结论: 1.通过芯片分析,得到电刺激清醒大鼠上矢状窦区硬脑膜后的差异基因。差异基因涉及多种信号通路,其中转运活动、电化学电位驱动转运蛋白活动这两个通路的富集性相对较好,分别有三个基因表达发生了变化。而大部分基因都参与了两个以上的通路调控。 2.与芯片结果相比,RT-PCR确证的10个基因变化趋势基本相同,证实了芯片杂交结果的可靠性。 3.AKAP5在电刺激与对照组中的表达无显著差异,吗啡对AKAP5的表达无显著影响。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前18条
1 楚宪襄,范天生,方智慧,王金兰;三叉神经核内NO合酶阳性神经元及其在电针后的变化[J];针刺研究;1994年Z1期
2 张衡,张敏,刘磊;刺激三叉神经核团各亚核引起呼吸效应的比较[J];生理学报;1989年06期
3 冯士生,周长满,鄂玲玲,杨松;胶质细胞源性神经营养因子在成年大鼠三叉神经节及三叉神经核团中的分布[J];解剖学报;2004年01期
4 ;电针对三叉神经核内痛敏细胞诱发放电的抑制作用的方式[J];吉林医科大学学报;1977年01期
5 姜磊;于生元;董钊;王晓琳;刘洁晓;;AKAP5在电刺激大鼠三叉神经核尾侧复合体的表达[J];现代生物医学进展;2014年06期
6 ;针刺镇痛在中枢神经系统内作用方式的研究——(一)三叉神经核内“痛”细胞放电[J];吉林医科大学学报;1975年02期
7 王贺波;三叉神经核尾侧部与脊髓后角的非同源性[J];中国疼痛医学杂志;2004年04期
8 ;电针对三叉神经核内痛敏细胞放电的抑制作用及其方式[J];中国科学;1977年06期
9 郝嘉楠;牛争平;;氟桂利嗪对硝酸甘油致偏头痛大鼠三叉神经核尾部C-fos蛋白表达的影响[J];中西医结合心脑血管病杂志;2007年04期
10 ;电针对三叉神经核内痛敏细胞诱发放电的作用[J];吉林医科大学学报;1977年01期
11 张富兴;董玉琳;李金莲;李云庆;;刺激三叉上核引起三叉神经中脑核神经元的突触反应(英文)[J];神经解剖学杂志;2010年01期
12 ;三叉神经核中的痛敏细胞放电[J];吉林医科大学学报;1977年01期
13 李征;于生元;梁景耀;董钊;刘若卓;代维;张明洁;;反复电刺激大鼠上矢状窦后的抑郁行为学表现[J];中国实验动物学报;2012年02期
14 肖凡;苏俭生;韩雯斐;;咀嚼刺激调节机体应激神经机制的研究进展[J];口腔颌面外科杂志;2020年01期
15 赵丽娟;牛争平;;ERK在偏头痛动物模型中的激活及与肥大细胞脱颗粒间的关系[J];中西医结合心脑血管病杂志;2011年05期
16 董习林;王渝蓉;;针刺治疗偏头痛作用机制的研究进展[J];中国中医急症;2015年06期
17 谢国玺;周仲福;韩济生;;家兔中脑导水管周围灰质和脊髓内的P物质在电针镇痛中有相反的作用[J];针刺研究;1985年02期
18 秦光成;谢景梅;刘春晓;陈力学;桂蓓;周冀英;;PTEN下调表达对反复发作性偏头痛大鼠模型行为学的影响[J];中国疼痛医学杂志;2016年01期
中国重要会议论文全文数据库 前20条
1 张明洁;梁景耀;陈小燕;刘若卓;董钊;于生元;;不可预测温和应激所致抑郁对电刺激上矢状窦硬脑膜产生的伤害性行为的影响[A];中华医学会疼痛学分会第十届学术年会论文集[C];2013年
2 赵洛鹏;刘璐;裴培;曲正阳;朱玉璞;王麟鹏;;电针对偏头痛大鼠5HT_(1D)受体表达的作用机制研究[A];第十八届中国科协年会——分16 针灸大科学研究学术高峰论坛论文集[C];2016年
3 张金璐;陈新林;吕海霞;刘勇;罗国刚;;JNK信号通路在电刺激大鼠偏头痛模型中降钙素基因相关肽表达调控作用机制研究[A];中华医学峰会暨中华医学会神经病学分会第八届全国中青年神经病学学术会议论文汇编[C];2015年
4 王丹;于生元;;雌激素对电刺激上矢状窦大鼠行为学及延脑头端腹内侧谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响[A];中华医学会疼痛学分会第十一届学术年会论文集[C];2014年
5 刘若卓;于生元;李凤鹏;邱恩超;;有先兆偏头痛大鼠三叉神经脊束核基因表达谱的实验研究[A];中华医学会疼痛学分会第八届年会暨CASP成立二十周年论文集[C];2009年
6 姜磊;于生元;刘若卓;;反复电刺激清醒状态下猫上矢状窦硬脑膜对三叉神经二级神经元兴奋性的影响[A];中华医学会疼痛学分会第七届年会论文摘要集[C];2007年
7 马迎存;樊碧发;;星状神经节阻滞联合韩氏穴位神经刺激仪治疗偏头痛的临床疗效观察[A];中华医学会疼痛学分会第十一届学术年会论文集[C];2014年
8 唐敦立;贾宏钧;于法彦;吴宗平;郑自贤;;丙成酸镁预防偏头痛[A];第三届全国中西医结合神经系统疾病学术会议论文集[C];2000年
9 贾志华;唐文晶;于生元;;VBM结构与病理学改变在偏头痛大鼠模型中的相关性分析[A];中华医学会疼痛学分会第十二届学术年会论文集[C];2016年
10 郭宇洁;宋文亭;刘建勋;;不同配伍中药方剂对偏头痛大鼠血清和脑组织中5-HT含量的影响[A];现代化中药制剂发展与中药药理学研究交流会论文集[C];2009年
11 易桂标;杨丽;;中脑导水管周围灰质与偏头痛研究进展[A];贵州省第六届中西医结合神经科学术年会论文汇编[C];2013年
12 章正祥;陈强;孔敏露;邓玉;侯群;;利扎曲普坦对于硝酸甘油诱导的偏头痛大鼠血清水通道蛋白4影响[A];2015年浙江省神经病学学术年会论文汇编[C];2015年
13 过燕萍;;偏头痛的脑结构改变[A];7th中华医学会神经病学分会全国中青年神经病学学术大会暨第十届全国神经系统感染性疾病与脑脊液细胞学学术大会论文汇编[C];2014年
14 王晓平;姜乐;;全外显子组捕获测序:确定普通偏头痛候选基因的初步研究[A];中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编(上)[C];2015年
15 邹静;季伟华;李颖;冯智英;李焰生;;偏头痛简易问卷的有效性初步分析[A];中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编(下)[C];2015年
16 过燕萍;;偏头痛的脑结构改变[A];中华医学会第十七次全国神经病学学术会议论文汇编(上)[C];2014年
17 张姝娟;刘彩云;;偏头痛性眩晕临床分析[A];中华医学会第十七次全国神经病学学术会议论文汇编(下)[C];2014年
18 ;偏头痛伴焦虑、抑郁症状的临床干预[A];2014年浙江省神经病学学术年会论文汇编[C];2014年
19 易洋;;偏头痛相关性眩晕的诊断[A];贵州省医学会第七届耳鼻咽喉头颈外科学术会议资料汇编[C];2014年
20 张建华;张婧;;偏头痛性眩晕生活质量调查[A];中国转化医学和整合医学研讨会论文综合刊[C];2015年
中国博士学位论文全文数据库 前18条
1 姜磊;偏头痛痛觉机制—电刺激清醒大鼠上矢状窦区硬脑膜后三叉神经核尾侧复合体基因表达谱的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
2 贾志华;偏头痛模型大鼠中影像学与组织学相关性的研究[D];中国人民解放军医学院;2017年
3 王丹;雌激素在头痛模型大鼠中的镇痛作用机制[D];中国人民解放军医学院;2015年
4 王晓琳;电刺激大鼠上矢状窦血管源性头痛模型的机制研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
5 周盛年;电刺激大鼠癫痫模型及基因芯片检测谷胱苷肽-巯-转移酶基因的表达[D];山东大学;2004年
6 刘若卓;有先兆偏头痛大鼠三叉神经脊束核基因表达谱的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
7 吕艳斐;电针对偏头痛模型大鼠腺苷A_1受体及信号转导通路的作用机制研究[D];山东中医药大学;2016年
8 朱鸿秋;雌二醇导致经行头痛的实验及经轻胶囊干预机制初探[D];成都中医药大学;2005年
9 刘香君;标本理论指导透刺法治疗无先兆型偏头痛的临床研究[D];广州中医药大学;2011年
10 董钊;一种新型的清醒状态血管源性头痛大鼠模型的建立与鉴定[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年
11 陈欣;偏头痛共病抑郁的神经影像研究[D];安徽医科大学;2021年
12 林坤成;电针治疗无先兆性偏头痛的临床研究[D];广州中医药大学;2010年
13 刘扬;低频率电刺激抑制杏仁核电点燃大鼠痫样发作的刺激参数研究[D];中南大学;2013年
14 郑英典;电针为主治疗无先兆型偏头痛疗效及机理的临床研究[D];广州中医药大学;2000年
15 陈思聪;应用光遗传学技术精确激活大鼠中脑导水管周灰质背侧区诱发防御行为的研究[D];浙江大学;2015年
16 郭志佳;心室阈下电刺激对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤影响的研究[D];山西医科大学;2015年
17 刘志刚;脊髓缺血再灌注损伤大鼠miRNA表达谱的筛选与初步分析[D];吉林大学;2015年
18 李静;A型肉毒毒素预防性治疗慢性偏头痛的临床随机研究[D];南京医科大学;2017年
中国硕士学位论文全文数据库 前20条
1 李征;反复电刺激大鼠上矢状窦后的抑郁行为学表现及5-羟色胺在血浆和不同脑区的变化[D];中国人民解放军医学院;2012年
2 宫春东;雌激素与G蛋白偶联受体30对大鼠慢性偏头痛的影响[D];河北医科大学;2020年
3 陈冲;颅痛颗粒治疗偏头痛大鼠的实验研究及联合针刺治疗的临床观察[D];泸州医学院;2011年
4 赵丽娟;ERK在偏头痛动物模型中的激活及与肥大细胞脱颗粒间的关系[D];山西医科大学;2011年
5 周宏;基于丘脑电刺激的大鼠机器人转向控制的研究[D];浙江大学;2015年
6 潘常玉;缓解期偏头痛大鼠模型建立及针刺风池穴对其行为学的效应机制[D];首都医科大学;2014年
7 赵丽姝;电刺激对脑梗死大鼠运动功能及骨形成蛋白表达的影响[D];山东大学;2010年
8 郝嘉楠;西比灵对硝酸甘油致偏头痛大鼠三叉神经核尾部c-fos蛋白表达的影响[D];山西医科大学;2007年
9 邓海燕;基于TLR4-MAPK通路探讨复方藜芍片改善慢性偏头痛大鼠头痛的机制研究[D];上海中医药大学;2019年
10 张峰;急性电刺激疑核对炎症性肠病大鼠IL-4、IL-10表达的影响[D];吉林大学;2009年
11 许春阳;睡眠诱导对偏头痛大鼠行为及不同脑区腺苷2A受体表达的影响[D];苏州大学;2019年
12 姜婷婷;头痛新一号加味治疗慢性偏头痛的临床研究[D];南方医科大学;2015年
13 李王文;PTEN介导NR2B-Tyr信号通路参与大鼠偏头痛慢性化的维持机制[D];重庆医科大学;2014年
14 丁燕;加味半夏白术天麻汤治疗痰浊型偏头痛的临床疗效观察[D];南京中医药大学;2020年
15 辛明霞;养血清脑方治疗无先兆偏头痛(血虚证)的临床观察[D];长春中医药大学;2020年
16 金洁利;慢性偏头痛的临床特征、诊断及随访分析[D];重庆医科大学;2016年
17 袁志勇;长春市永昌社区头痛(偏头痛)中医证候分布调查及发病因素分析[D];长春中医药大学;2015年
18 黄瑞凝;头痛新1号与辨证论治治疗小儿偏头痛的疗效对比研究[D];南方医科大学;2013年
19 侯春久;芎麻汤治疗偏头痛有效部位的研究[D];湖南中医药大学;2012年
20 吴振坤;推拿治疗偏头痛的临床研究[D];黑龙江中医药大学;2001年
中国重要报纸全文数据库 前20条
1 本报见习记者 田瑞颖;偏头痛“松箍咒”获破译[N];中国科学报;2021年
2 资阳市人民医院 尹琴;治疗和预防偏头痛,这份指南请收好[N];大众健康报;2022年
3 记者 耿挺;揭示抗偏头痛新药选择性作用机制[N];上海科技报;2021年
4 鲁捷;研究发现绿光可缓解偏头痛[N];中国科学报;2016年
5 本报实习记者 张天一;看中医如何对待偏头痛[N];中国医药报;2015年
6 本报实习记者 张天一;正确认识和对待偏头痛[N];中国医药报;2015年
7 本报记者 顾泳;扰人心的偏头痛,能根治吗[N];解放日报;2013年
8 记者 刘海英;科学家找到偏头痛遗传根源[N];科技日报;2013年
9 ;偏头痛不可等闲视之[N];保健时报;2004年
10 ;Pozen公司偏头痛治疗药物在英国获批[N];医药经济报;2005年
11 驻京记者 贾岩;偏头痛莫偏离治疗“轨道”[N];医药经济报;2010年
12 本报记者 姜靖;基因一变异 你就偏头痛?[N];科技日报;2011年
13 本报记者 李颖;小心偏头痛,严重时可致残[N];科技日报;2011年
14 本报记者 李颖;滥用药物可加剧偏头痛[N];科技日报;2010年
15 何屹;普通偏头痛遗传因素首次确定[N];科技日报;2010年
16 本报记者 王海蕴;偏头痛性质不同用药有别[N];中国消费者报;2002年
17 本报记者 李文瑶;重视缓解偏头痛[N];吉林日报;2009年
18 ;三方法缓解偏头痛[N];吉林农村报;2008年
19 ;三个小方法缓解偏头痛[N];家庭医生报;2008年
20 健康时报特约记者  朱晓敏;8种情况易加重偏头痛[N];健康时报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978