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耐药脊柱结核的个体化诊疗模式的临床与基础研究

李大伟  
【摘要】: 目的:观察耐药脊柱结核的个体化诊疗模式的临床疗效,并通过ELISPOT、聚合酶链反应-寡核苷酸探针膜反向斑点杂交技术检测技术对脊柱结核诊断的研究,探讨个体化诊疗模式在耐药脊柱结核中的应用。 方法:对我院2005年3月~2009年4月间的60例耐药脊柱结核患者进行回顾性研究。男36例,女24例,年龄5~79岁,平均为47.3岁。采用个体化诊疗模式,根据病灶部位及病变程度个体化选择术式,采用经脊柱前路、肋横突或后路病灶清除、植骨、内固定。在药敏试验结合耐药基因检测指导下个体化抗结核治疗18~24个月,对患者进行疗效评估。随访时间1~5年,平均3.1年;通过以结核菌素试验(TST)为对照,应用酶联免疫斑点(ELISPOT)技术分别检测52例脊柱结核,49例脊柱退行性变患者外周血标本;通过以传统药敏试验为对照,采用聚合酶链反应-寡核苷酸探针反向斑点杂交技术方法,检测50株脊柱结核病灶中结核菌临床分离株中对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇耐药的基因:katG、rpoB、rpsL/rrs和embB。 结果:术后临床症状明显改善,2例术后复发,再次手术治疗。57例患者植骨融合。术后ASIA分级,A级2例恢复C级,B级5例升至D级,C级13例,11例至E级,2例D级,D级14例至E级。Cobb角平均矫正19°。52例结核患者中ELISPOT和TST结果分别是42例强阳性,5例阳性,3例阴性;13强阳性,19例阳性,20例阴性。49例脊柱退行性变患者中43例阴性,4例阳性,2例强阳性;10例强阳性,16例阳性,23例阴性。23株结核菌药物敏感株的5种耐药基因均为野生型。27株结核菌耐药分离株中,21株为耐INH株,katG基因突变率为77.8%,24株为耐RFP株,rpoB基因突变率为88.9%,13株为耐SM株,rpsL基因突变率为40.7%, rrs基因突变率为7.4%,9株为耐EMB株,embB基因突变率为33.3%。 结论:在药敏试验结合耐药基因检测指导下个体化抗结核治疗基础上,根据病灶情况个体化选择术式,对耐药脊柱结核的个体化治疗模式有较好的临床疗效。ELISPOT检测技术优于TST,可作为脊柱结核筛查的指标。PCR-寡核苷酸探针反向斑点杂交技术可快速分析结核菌耐药基因突变及其耐药性。综上所述,以ELISPOT、PCR-寡核苷酸探针反向斑点杂交实验室诊断技术为基础,耐药脊柱结核个体化诊疗模式有较好的应用前景。


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