收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

循环microRNAs作为潜在的肝脏相关疾病标记物的初步研究

桂俊豪  
【摘要】:非编码RNA (non-coding RNA, ncRNA)是当前生命科学研究的前沿热点之一,其中,microRNAs (miRNAs)是一大类新型的、细胞内源性的单链非编码小RNA,由基因组中的miRNA基因(miRNAs genes)编码。成熟miRNAs的平均长度约22 nt,广泛分布于各种生命体,作为RNA诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex, RISC)的核心功能要素之一,主要通过与其靶mRNA (messenger RNA, mRNA)的3'-UTR区(3'-untranslated region,3'-UTR)互补结合,进而抑制mRNA的翻译或诱导mRNA降解,发挥RNA介导的转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS)效应,对细胞增殖、分化、凋亡等一系列生命现象发挥广泛的生物学调控作用。 据生物信息学预测,人类基因组编码的miRNAs可能超过1000种。研究发现,在不同的生理病理状态下,组织、细胞的miRNAs表达谱具有独特的时空特异性和组织特异性,miRNAs异常表达调控与肿瘤等多种人类疾病的发生发展密切相关。最近研究显示,血浆或血清中的循环miRNAs (circulating miRNAs, cir-miRNAs)可能是一类具有潜在临床应用价值的新型生物标志物(biomarker)。业已表明,肿瘤、心血管病等疾患个体的血浆或血清中存在如miR-92和miR-1等一些异常表达的、可能有助于疾病诊断及预后评估的循环miRNAs。 基于目前循环miRNAs的研究新进展,我们有理由推测:在正常机能状态下,机体内循环miRNAs的种类及其表达丰度可能处于一个相对稳定、平衡的状态,而机体内器官组织的功能、代谢异常或器质性病变等因素可能会直接或间接地破坏机体内循环miRNAs的稳态(homeostasis),表现为特定生理或疾病状态下某些循环miRNAs的表达水平的变化。 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染、慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)(简称慢性乙肝)、肝纤维化(liver fibrosis,LF)、肝硬化(livercirrhosis, LC)和肝细胞癌(hepatocelluler carcinoma, HCC)等肝脏疾病(简称肝病)依旧严重危害人们身体健康,进一步发展更加特异、敏感的肝脏疾病生物标志物可以弥补ALT、AST、AFP等传统血清学标志物的不足,对于提高肝脏相关疾病的辅助诊断、评估及健康管理等具有十分重要的临床意义。 因此,为探索循环miRNAs对于肝脏相关疾病辅助诊断的潜在意义,本论文主要进行了四个方面的工作:第一,建立利用实时定量PCR (real-time quantitative PCR, rt-qPCR)对临床血清标本中循环miRNAs进行定量测定的技术平台。第二,采用基于qPCR (quantitative PCR)的TaqMan低密度阵列(TaqMan low density array, TLDA)技术,对健康个体、肝细胞癌(HCC)和肝硬化(LC)患者血清参考标本中的循环miRNAs进行了初步分析,以期筛选潜在的肝脏疾病相关的循环miRNAs。第三,通过分析筛选结果,选择5种在HCC和LC血清中表达上调的、可能与肝脏疾病相关的miRNAs(即miR-146a,-215,-224,-573-3p和miR-885-5p)进行初步验证。第四,基于有关文献进行数据挖掘,分析miR-885-5p在不同人体组织中的表达及分布,进一步采用TargetScan等生物信息学软件对miR-885-5p的潜在靶基因进行预测和分析。主要获得以下四个方面的结果:第一,建立了循环miRNAs定量的技术路线。第二,验证了TLDA技术用于循环miRNAs筛选的可行性。第三,发现慢性乙型肝炎、肝硬化及肝细胞癌患者血清中miR-885-5p的表达丰度显著升高。ROC (receiver operating characteristic, ROC)分析显示,miR-885-5p用于鉴别肝脏相关疾病与健康个体时的曲线下面积(the area under curve,AUC)为0.904,特异性为79.17%,敏感性为90.53%。最后,基于文献分析,发现miR-885-5p在肝脏组织中具有较高的表达水平。生物信息学分析显示,在胆固醇逆向转运(cholesterol reverse transport, CRT)及磷脂等脂类代谢中具有重要功能的ATP结合盒转运体超家族成员ABCA1 (ATP-binding cassette sub-family A member 1, ABCA1)是miR-885-5p的潜在靶基因之一。 本论文建立的技术平台可为循环miRNAs的实时定量提供参考,发现并初步验证了血清miR-885-5p可能是一种有助于肝脏疾病诊断的新型标志物。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 贺凯;苏松;李波;张孟俞;冯春红;夏先明;;T淋巴细胞在缺血肝脏再灌注早期表达的实验研究[J];现代预防医学;2011年18期
2 葛京平;徐锋;程文;杨斌;张春妮;高建平;张征宇;张庆玲;许传亮;孙颖浩;;肾透明细胞癌相关特异性miRNAs差异表达谱[J];医学研究生学报;2011年08期
3 傅永清;华晨;陈炳荣;张军;王海娜;周剑;裘华森;;快速康复外科对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究[J];浙江中医药大学学报;2011年03期
4 赵娟芳;李锋;;miRNA表达检测方法的研究进展[J];农垦医学;2011年01期
5 秦安东;徐林;;microRNAs与肺癌关系的研究进展秦安东综述,徐 林审校[J];肿瘤防治研究;2011年06期
6 石庚生;;姜黄素对脓毒症小鼠肝脏炎性反应的抑制作用[J];现代医药卫生;2011年18期
7 高传长;李冬盛;王恺;邹书兵;;丹参对大鼠移植肝血红素氧合酶1表达的影响[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年31期
8 徐田云;汤仁仙;刘转转;付琳琳;万青;刘宜升;孔德龙;尤红娟;杜文平;刘瀛;郑葵阳;;华支睾吸虫感染小鼠肝脏中TLR2 mRNA动态表达的初步研究[J];中国病原生物学杂志;2011年08期
9 时皎皎;糜漫天;韦娜;王斌;;不同脂肪酸构成对大鼠肝脏HMG-CoAR、SREBP-1c表达的影响[J];西南国防医药;2011年08期
10 于秋红;刘裕婷;韩莹;谢广云;刘娜;黄沛力;牟颖;韩四海;;碲化镉量子点在小鼠血液和肝脏中的代谢特征[J];环境与健康杂志;2011年05期
11 徐林;任涛;秦安东;周涯;罗军敏;姚新生;李颖;;microRNA-7对人肺癌95D细胞体外侵袭的作用[J];遵义医学院学报;2011年01期
12 李红艳;农林玲;李丽娅;胡春萍;周倩;梁玉倩;姚圆圆;;玉米黄质的调脂作用及抗高脂诱发氧化损伤的动物实验研究[J];江苏预防医学;2011年04期
13 刘梅梅;陈晓宇;王栋;宋先兵;黄学应;张腾腾;;甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪肝大鼠肿瘤坏死因子-α表达的影响及机制[J];安徽医科大学学报;2011年08期
14 牛启兵;郭平凡;;缺血后处理对肢体缺血/再灌注大鼠肝脏的保护效应[J];医学综述;2011年10期
15 张敏;许翠萍;;TGF-β_1在非酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏组织中的表达及意义[J];求医问药(下半月);2011年05期
16 薛过;王伟伟;赵雅君;张伟华;王丽娜;李红霞;张力;徐长庆;;外源性多胺对老年大鼠抗衰老作用的实验研究[J];中国药理学通报;2011年08期
17 姚聪;赵显茂;Colin RJ;王素青;;CYP1B1基因敲除对高脂膳食诱导小鼠肥胖的抑制作用[J];环境与健康杂志;2011年04期
18 宋瑞华;许翠萍;;MMP-9和MMP-2在非酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏组织中的表达及意义[J];求医问药(下半月);2011年05期
19 张莹;段自皞;陈熙;张程;徐德祥;;脂肪酸合成在利福平引起小鼠肝脏脂肪变性中的作用[J];安徽医科大学学报;2011年07期
20 骆助林;王曙光;汪涛;李大江;戴睿武;任建东;田伏洲;;大鼠自体肝移植中暂时性门体分流对肝脏的保护作用[J];江苏医药;2011年13期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王敏;杨景林;;《非酒精性脂肪性肝病的诊疗指南》2009修改版解读[A];贵州省中西医结合学会2010年消化系病学术交流会暨非酒精性脂肪肝研究进展学习班资料汇编[C];2010年
2 安蓓;陈卓;李仁德;;温度对荒漠沙蜥体内肝脏组织中SOD活性的影响[A];中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编[C];2003年
3 焦士蓉;王波;黄承钰;于爽;阴文娅;;糖尿病小鼠肝组织氧化损伤研究[A];食物功效成分与健康——达能营养中心第九次学术年会会议论文集[C];2006年
4 夏丁;陈志强;叶章群;;特发性高草酸尿症大鼠肝脏差异表达基因的筛选研究[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
5 陈少贤;施畅;;红花注射液对慢性低氧高二氧化碳大鼠肝脏组织TGF-β1表达的影响[A];2008年浙江省内科学学术会议论文汇编[C];2008年
6 姚晖;姜晓刚;张继平;焦河玲;邓虹珠;;哈蟆油对D-半乳糖致雄性衰老大鼠肝脏组织STAT3蛋白的影响[A];2010年广东省药师周大会论文集[C];2011年
7 栾新红;胡仲明;刘维全;江禹;柳巨雄;王凯;;银染DD-PCR法筛选游泳疲劳小鼠肝脏中差异表达基因的初步研究[A];中国生理学会应用生理学专业委员会暨《中国应用生理学杂志》二十周年纪念大会和学术讨论会论文集[C];2005年
8 焦士蓉;黄承钰;王波;于爽;阴文娅;;枳实提取物对糖尿病小鼠肝脏抗氧化防御功能的影响[A];第二届中国西部营养学术会议专题报告及论文摘要汇编[C];2006年
9 ;Computational Prediction and Experimental Verification of miRNAs in Panicum milaceum L[A];植物分子生物学与现代农业——全国植物生物学研讨会论文摘要集[C];2010年
10 张娟;熊玉卿;;熊果酸肝脏摄取及转运机制的研究[A];第十二次全国临床药理学学术会议会议论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 桂俊豪;循环microRNAs作为潜在的肝脏相关疾病标记物的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
2 牛文洋;肝细胞癌血清特异miRNAs的筛选及其在诊断中的应用[D];第二军医大学;2011年
3 吴绍华;不同倍性水稻miRNAs及其靶基因的鉴定与表达分析[D];四川农业大学;2011年
4 张志平;神经管畸形与正常胚胎脑组织miRNAs差异表达分析及其靶mRNA的功能预测[D];中国协和医科大学;2010年
5 郭玲;UVB相关的miRNAs的筛选及其功能的初步研究[D];南方医科大学;2010年
6 胡凯;癫痫大鼠海马miRNAs表达谱和miR-34a与-9在癫痫发生中动态变化的研究[D];中南大学;2012年
7 吴正升;乳腺癌细胞侵袭转移相关miRNAs的研究[D];复旦大学;2012年
8 张媛;结直肠癌中miRNAs表达谱的研究[D];延边大学;2012年
9 唐任宽;慢性炎症状态下脂质代谢紊乱及肝脏、主动脉损害的分子机制[D];重庆医科大学;2008年
10 曹东林;急性髓性白血病相关miRNAs的功能研究[D];南方医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 贾音;血浆中的MicroRNA在肝损伤性疾病检测中的应用[D];第二军医大学;2010年
2 刘忠华;鹅正常肝脏与肥肝差异表达蛋白质检测与分析[D];扬州大学;2008年
3 徐珊珊;门脉高压肝脏血管内皮生长因子受体分布的研究[D];中国医科大学;2010年
4 张萍;人牙髓干细胞向成牙本质细胞定向分化过程中miRNAs表达谱筛选及鉴定的实验研究[D];第三军医大学;2011年
5 区丹敏;内毒素血症小鼠肺组织中miRNAs的表达变化及功能的初步研究[D];中南大学;2012年
6 黄潘;鸡胚性分化早期性别差异表达miRNAs的鉴定及其特性分析[D];华中农业大学;2010年
7 张丽洁;胎儿与成人主要器官miRNAs的表达量分析[D];华中科技大学;2011年
8 田甜;miRNAs基因区域多态与肺癌易感性及预后关系的分子流行病学研究[D];南京医科大学;2009年
9 朱珍;肝脏未分化胚胎性肉瘤的微卫星杂合性缺失和miRNAs谱表达特征及其临床病理学意义[D];第二军医大学;2012年
10 张磊;茄子与绒毛状烟草microRNAs的生物信息学分析及验证[D];中国农业科学院;2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 刘霞;美用miRNAs制造出诱导多功能干细胞[N];科技日报;2011年
2 本报记者 张旭;替比夫定长期治疗可改善肝脏组织学[N];中国医药报;2011年
3 孙燕燕;科学家培育出人造肝脏组织[N];北京科技报;2006年
4 ;肝脏受伤四因素[N];医药导报;2008年
5 彭梦瑶;脐带血干细胞培育出人类肝脏组织[N];新华每日电讯;2006年
6 杨来凤;鱼类肝脏病要及早防治[N];中国渔业报;2005年
7 蒋建平;世界首个“人造肝脏”英国问世[N];中国医药报;2006年
8 张旭;改善肝脏组织学 抑制病毒复制[N];中国医药报;2005年
9 禾黎;吴孟超:神刀济苍生 肝胆照人间[N];中国国土资源报;2006年
10 张鹏;肝瘤巨大被判“死刑”妙手切除获得“新生”[N];科技日报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978