收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

EphA2基因多态性与中国汉族年龄相关性白内障遗传易感性的关系及分子机制研究

谭薇  
【摘要】:一、研究背景 年龄相关性白内障(Age-related cataract,ARC)为全球首位致盲性眼病,随着全球人口老龄化明显加剧,其发病率将不断增加。明确ARC的发生机理对于ARC的防治具有重要意义。ARC的确切发病原因和发病机制尚不完全清楚,目前认为该病是由多种遗传和环境因素共同导致的复杂性状多基因病。最新研究发现生促红素人肝细胞受体酪氨酸激酶A2(Eph-receptor tyrosinekinase-type A2,EphA2)基因是与ARC发生相关的一个重要基因。国外研究证实高加索人群EphA2基因多态性与皮质性ARC相关,但EphA2基因突变导致ARC的机制尚不清楚。有关中国汉族人群中ARC与EphA2基因多态性的研究尚无报道。 晶状体上皮细胞凋亡异常是除先天性白内障外各种白内障的重要的致病机制。EphA2受体广泛表达于上皮来源的细胞,其介导的信号传导,如活化MAPK途径,导致ERK活化,参与调控细胞增殖、细胞间粘附、细胞迁移和细胞凋亡等多种功能。衰老是ARC最为重要的一个危险因素,我们推测EphA2基因变异可能是通过影响EphA2的表达或磷酸化水平,影响MAPK/ERK通路的信号传导,促进晶状体上皮细胞的凋亡,从而导致ARC的发生,而老化则强化了这个致病过程,加速了ARC的发生。 二、研究目的 分析中国汉族人群中EphA2基因多态性与皮质性ARC易感性的关系;探讨EphA2多态性及老化对晶状体上皮细胞凋亡的影响以及MAPK/ERK信号通路在ARC发生发展中的作用,阐明ARC发生的分子机制。 三、研究内容 1.采用大样本病例对照研究方法,选取EphA2基因的五个位点(rs3768293、rs3754334、rs477558、rs707455和rs7548209),用PCR-RFLP方法进行EphA2基因分型,比较等位基因频率及基因型频率分布在皮质性ARC患者和健康对照组之间是否存在差异,明确EphA2基因多态性与ARC易感性的关系,找出疾病相关的SNPs。 2.收集ARC患者晶状体前囊膜上皮组织,以角膜移植术中的透明晶状体前囊膜上皮组织作为健康对照,用荧光定量PCR法检测EphA2及ERK1/2的mRNA表达变化,Western-Blot方法检测EphA2、p-EphA2、ERK1/2、p-ERK1/2的蛋白表达。探讨EphA2与ERK1/2在ARC患者晶状体前囊膜上皮组织中的表达及意义。 3.检测ARC患者晶状体前囊膜上皮组织caspase-3,caspase-9和bcl-2的mRNA表达变化及caspase-3,active caspase-3的蛋白表达,探讨凋亡相关基因在ARC发生发展中的作用。 四、研究结果 1.对422例皮质性ARC患者及317例健康对照EphA2基因5个多态位点进行分型,发现EphA2基因rs477558和rs7548209位点的基因型和等位基因频率在ARC患者和健康对照组之间有显著的差异。ARC患者rs477558AA基因型、rs7548209GG基因型及rs7548209G等位基因的频率均显著高于健康对照组(Pc 0.05);ARC患者rs477558AG基因型、rs7548209CG基因型及rs7548209C等位基因的频率均显著低于健康对照组(Pc 0.05);而EphA2基因的rs3768293,rs3754334和rs707455位点等位基因和基因型频率分布,在ARC患者和健康对照组之间均无显著差异(Pc0.05)。另外对年龄进行的分层分析发现,年龄≥75岁组ARC患者rs7548209位点的GG基因型和G等位基因频率显著高于健康对照组(Pc 0.05)。 2. ARC患者晶状体前囊膜上皮组织中EphA2、ERK1/2的mRNA及蛋白表达水平和p-EphA2、p-ERK1/2的蛋白表达水平均明显降低(P0.01)。不同年龄、同种基因型组ARC患者之间比较,年龄≥75岁组EphA2、ERK1/2的mRNA及蛋白表达水平和p-EphA2、p-ERK1/2的蛋白表达水平明显低于年龄75岁组(P 0.05)。相同年龄,不同基因型组(EphA2GG、EphA2CG和EphA2CC)ARC患者之间,EphA2、ERK1/2的mRNA及蛋白表达水平和p-EphA2、p-ERK1/2的蛋白表达水平均没有显著差异(P0.05)。 3. ARC患者晶状体前囊膜上皮组织中caspase-3,caspase-9的mRNA水平及caspase-3、active caspase-3的蛋白表达水平均明显升高(P 0.01)。不同年龄、同种基因型组ARC患者之间比较,年龄≥75岁组caspase-3、caspase-9的mRNA水平及caspase-3,active caspase-3的蛋白表达水平明显高于年龄75岁组(P 0.05)。相同年龄组,不同基因型组(EphA2~(GG)、EphA2~(CG)和EphA2~(CC))ARC患者之间,其caspase-3,caspase-9的mRNA水平及caspase-3,active caspase-3的蛋白表达水平均没有显著差异(P0.05)。 与健康对照组比较,各组ARC患者晶状体前囊膜上皮组织bcl-2的mRNA水平均明显降低(P 0.01)。不同年龄、同种基因型组ARC患者之间比较,年龄≥75岁组bcl-2的mRNA水平明显低于年龄75岁组(P 0.05)。相同年龄,不同基因型组(EphA2GG、EphA2CG和EphA2CC)ARC患者之间,bcl-2的mRNA水平均没有显著差异(P0.05)。 五、结论 1. EphA2基因多态性与中国汉族皮质性ARC的遗传易感性相关;且经年龄分层分析发现rs7548209的GG基因型和G等位基因的频率分布随年龄增长而增加。 2.年龄增长(或老化)可显著影响与白内障发生有关的晶状体上皮细胞的凋亡,其机理可能与EphA2表达与活性降低,抑制了ERK1/2信号通路,导致细胞凋亡有关。 3. EphA2rs7548209位点的多态性不改变晶状体上皮细胞EphA2的水平,也不影响细胞凋亡,提示rs7548209多态性可能仅是疾病的标记而非疾病的致病原因(致病性SNP)。 4. EphA2rs7548209多态性使ARC发生率增加的原因可能是年龄增长(或老化)使晶状体上皮细胞凋亡增加与rs7548209多态性引起ARC的其他未知因素共同作用的结果。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 周燕;陈丽荣;申屠形超;;晶状体前囊膜上皮细胞上标记PCNA的方法[J];临床与实验病理学杂志;2006年02期
2 赵桂秋;潘绍新;胡丽婷;;核因子κB在年龄相关性白内障晶状体前囊膜的表达[J];眼科研究;2010年08期
3 李秋明,孟繁剑;晶状体前囊膜的立体培养研究[J];眼科研究;2003年03期
4 刘莲;钟敬祥;张广斌;汪炬;高思红;;HSP70在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义[J];眼科研究;2007年11期
5 刘建亭;张素华;刘杰为;钱军;;依地酸二钠预防后发性白内障的实验研究[J];临床眼科杂志;2008年01期
6 吴丹,李珊珊,乔玉环,Jahn M.Nesland,索振河;宫颈鳞癌组织中EphA2基因的表达[J];郑州大学学报(医学版);2004年03期
7 谭浅,罗栋强,蒋剑;骨桥蛋白在白内障晶状体上皮细胞中的表达[J];国际眼科杂志;2005年04期
8 廖萱;赵敏;;巯基转移酶在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达研究[J];华西医学;2009年06期
9 范芳,葛正龙,李长福,曾小平,李海祥;c-myc ASODN对半乳糖诱导的晶状体上皮细胞中cMyc蛋白表达及细胞周期的影响[J];第四军医大学学报;2004年11期
10 李桂荣;苏冠方;周鸿雁;;老年白内障晶状体上皮细胞凋亡及凋亡基因的表达[J];中国老年学杂志;2007年12期
11 胡美霞;罗国容;周素芳;莫发荣;谢小薰;梁皓;;衰老标记蛋白-30在人晶状体上皮细胞中的表达及意义[J];眼科新进展;2008年01期
12 张丽;王丽娜;王万辉;;热休克蛋白70在老年性白内障晶状体上皮细胞的表达及意义[J];中国中医眼科杂志;2008年01期
13 马楠;严宏;马吉献;;晚期糖基化终末产物受体在年龄相关性白内障及透明晶状体上皮细胞的表达[J];眼科新进展;2011年06期
14 张平,陈晓春,陈江,平浩,谷龙杰;EphA2和E-cadherin在前列腺癌中的表达及其意义[J];华中科技大学学报(医学版);2005年01期
15 潘陆平;王万辉;;急性高眼压对兔晶状体上皮细胞的影响[J];中国中医眼科杂志;2007年05期
16 刘燕;周健;刘新平;药立波;惠延年;;新基因c24的克隆及其在正常及白内障晶状体上皮细胞中的表达[J];眼科研究;2007年11期
17 张虹,李贵刚,谢二娟;不同类型白内障晶状体上皮细胞密度分析[J];眼科新进展;2003年04期
18 张虹,胡维琨,谢二娟,彭洁,李贵刚,王毓琴;氯通道蛋白-3在透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞中的表达[J];华中科技大学学报(医学版);2005年05期
19 李青;杨佩菲;;凋亡相关基因Caspase-9在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义[J];福建医药杂志;2006年02期
20 李桂荣;周鸿雁;张文松;;转化生长因子β_2(TGF-β_2)在老年性白内障与正常晶状体上皮细胞中mRNA表达的差异[J];中国实验诊断学;2011年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 赵伟东;周娜;梁悦;方文刚;陈誉华;;EphA2受体参与维持脑微血管内皮细胞的紧密连接结构[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
2 黄秀榕;祁明信;李坤鹏;陈义;;尾加压素Ⅱ体外促进晶状体上皮细胞增殖的细胞信号转导机制[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年
3 左连富;刘辉;郭建文;刘江惠;张杰英;;胃癌组织中EphA2基因的表达及与细胞凋亡、增殖的关系[A];第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议论文汇编[C];2009年
4 左连富;刘辉;郭建文;刘江惠;;EphA2在胃癌组织中的表达及与血管生成的关系[A];第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议论文汇编[C];2009年
5 郭建文;刘辉;刘江惠;左连富;;EphA2在胃癌中的表达及其意义[A];第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议论文汇编[C];2009年
6 詹敏;李志英;;内障丸加减方对氧化损伤晶状体上皮细胞作用的透射电镜观察[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年
7 刘辉;左静;郭建文;刘江惠;张杰英;左连富;;格尔德霉素对人胃癌细胞株MGC-803增殖与凋亡的影响[A];第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议论文汇编[C];2009年
8 徐国兴;崔丽金;;石决明对体外培养晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用的研究[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年
9 谢伟英;徐国兴;庄华;;CTGF及其反义寡核苷酸对体外培养的人晶状体上皮细胞表达COL-Ⅰ、MMP-2、TIMP-2的影响研究[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年
10 俞一波;姚克;吴炜;;急性手机微波辐射对人眼晶状体上皮细胞热休克蛋白表达的影响[A];2007年浙江省眼科学术会议论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 谭薇;EphA2基因多态性与中国汉族年龄相关性白内障遗传易感性的关系及分子机制研究[D];第三军医大学;2012年
2 刘勇;EphA2调控头颈鳞癌侵袭转移的体内外实验研究[D];中南大学;2012年
3 杨筱祎;酪氨酸激酶受体EphA2在输卵管妊娠组织中表达的研究[D];暨南大学;2010年
4 张一栋;1.8GHz微波辐射对人晶状体上皮细胞蛋白质表达影响的研究[D];浙江大学;2012年
5 谭平清;EphA2调控鼻咽癌紫杉醇化疗敏感性及其分子机制的实验研究[D];中南大学;2012年
6 袁伟杰;EphA2基因沉默对胃癌SGC-7901细胞侵袭力的影响及相关机制研究[D];中南大学;2010年
7 张志勇;小窝蛋白-1在高糖诱导的人晶状体上皮细胞凋亡调控中的作用[D];浙江大学;2009年
8 邢星;组织型转谷氨酰胺酶在后囊膜混浊中的作用研究[D];华中科技大学;2010年
9 包秀丽;Wnt信号诱导人晶状体上皮细胞上皮间充质转化和增殖的研究[D];天津医科大学;2012年
10 柳珑;GEFT调节晶状体上皮细胞分化的机制研究[D];湖南师范大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张一真;子宫颈鳞状细胞癌组织中血管生成拟态和EphA2的表达及意义的研究[D];南昌大学;2011年
2 解曙哲;EphA2蛋白在胃腺癌中的表达及意义[D];山西医科大学;2010年
3 刘岩;EphA2在甲状腺乳头状癌中的表达及意义[D];河北医科大学;2011年
4 刘亚会;人晶状体上皮细胞中bax的表达与白内障形成的相关性研究[D];大连医科大学;2010年
5 苗青;环孢霉素A对人晶状体上皮细胞抑制的体外研究[D];天津医科大学;2013年
6 焦征;FAK在人脑胶质瘤中的表达及其与EphA2相关性研究[D];广州医学院;2010年
7 张训;EphA2与MMP2在胶质瘤组织中的表达及其相关性研究[D];广州医学院;2010年
8 修鑫鑫;茶多酚对紫外线诱导大鼠晶状体上皮细胞中Caveolin-1、MMP-2表达的影响[D];辽宁医学院;2012年
9 王频;HIF-1α-EphA2通路对食管鳞癌血管生成拟态的影响[D];南京医科大学;2011年
10 金海鹰;晶状体上皮细胞端粒酶活性及衰老、凋亡的实验研究[D];暨南大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 张中桥;白内障与晶状体上皮细胞改变有关[N];中国医药报;2002年
2 王振岭;消化分离法培养人晶状体上皮细胞[N];中国医药报;2002年
3 余宁宁 李水根;后发性白内障发生机理探明[N];健康报;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978