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miR-574-5p、Gomafu和QKI对人宫颈癌细胞生长、转移的影响及相关护理干预研究

罗羽  
【摘要】:研究背景: 宫颈癌的发病率位居女性肿瘤第二位,对其发生发展的分子机制和护理干预研究意义重大。miR-574-5p、QKI以及Gomafu在宫颈癌细胞中的表达及它们在宫颈癌中的作用与机制还不清楚。在本项研究中,我们比较系统地研究了致癌微小RNAmiR-574-5p、抑癌蛋白QKI以及长非编码RNA Gomafu在宫颈癌细胞中的表达以及它们之间可能存在的联系。为探讨护理干预是否能诱导miRNAs的快速应激,本课题还研究了UV照射、缺氧、温度等部分护理干预对HeLa细胞miR-574-5p表达的影响,以及上述护理干预对细胞周期、存活以及克隆形成能力及迁移等方面的影响。 研究意义: 本研究希望揭示miR-574-5p、Gomafu以及QKI之间可能的联系及它们在人宫颈癌发生发展中的作用与机制。以期通过揭示基因调控的作用,获得部分常见临床护理干预手段能影响miRNAs的实证,为宫颈癌预治和护理手段的制定及继续研究提供借鉴和思路。 研究方法: Real-time RT-PCR、Western Blot、细胞划痕实验、细胞克隆能力检测、Transwell细胞转移和侵袭实验、流式细胞测试、活体成瘤实验。 研究内容: 1)在临床宫颈癌组织样本中研究miR-574-5p、QKI基因及Gomafu表达情况; 2)通过过表达或siRNA介导的敲降,研究miR-574-5p、QKI基因及Gomafu三者间可能的相互作用及这些基因对细胞增殖、转移、侵袭能力的影响; 3)利用裸鼠移植瘤实验探讨抑制miR-574-5p对宫颈癌肿瘤生长的影响; 4)研究一些常见护理干预手段可能对HeLa细胞miR-574-5p表达,克隆形成、转移能力等方面的影响。研究结果: 1)宫颈癌组织中miR-574-5p表达较癌旁组织显著升高,相反,Gomafu、总QKI(pan-QKI)和QKI-5mRNA和蛋白表达均下降。且miR-574-5p与QKI变化呈负相关。 2)过表达miR-574-5p后pan-QKI、QKI-5mRNA表达下降,Gomafu表达上升,HeLa细胞增殖、转移、克隆能力上升;抑制miR-574-5p后pan-QKI、QKI-5mRNA表达上升,Gomafu表达明显降低。 3)抑制miR-574-5p后,HeLa细胞克隆形成能力、迁移和侵袭能力显著下降,人宫颈癌HeLa细胞的活体成瘤能力受到极显著抑制。 4)部分临床常见的护理手段能对miR-574-5p的表达,HeLa细胞繁殖和转移、甚至细胞周期产生一定影响。如UV照射能显著降低HeLa细胞miR-574-5p的表达,并明显抑制细胞迁移;重度缺氧明显降低HeLa细胞的存活率,导致其程序性死亡比例显著上升,以及G1期细胞比例下降、G2/M期细胞比例升高。不同孵育温度也能影响miR-574-5p的表达和细胞的增殖能力。 结论: 宫颈癌细胞或组织中的miR-574-5p、Gomafu以及QKI的表达发生了显著的异常下调或上调;这些RNA或蛋白的表达变化可通过影响癌细胞迁移、侵袭、增殖、克隆形成能力,影响宫颈癌的发生、发展;一些护理干预,如UV照射、缺氧、及孵育温度等均能不同程度影响miR-574-5p的表达和HeLa细胞的增殖及转移,研究结果可为进一步的临床研究提供参考和依据。


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