收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

S100B在肺癌脑转移患者血清中含量检测及相关转移机制研究

庞晓雯  
【摘要】:背景: 肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,其发病率具有明显逐年上升的趋势,已成为威胁人类生命健康的主要疾病之一。肺癌约20%-50%会发生脑转移,随着肺癌综合治疗的进展,患者生存期的延长以及检查方法的改进,肺癌脑转移的诊断率逐渐增高。其中腺癌的脑转移发生率最高,其次为小细胞肺癌。脑转移是肺癌死亡相关的重要病因,自然生存期仅为1-2月。在临床治疗中,对于肺癌脑转移的治疗方法如手术、放疗、化疗等均在不断改进,但是治疗效果仍不尽人意,究其主要原因是目前对肺癌脑转移的发生机制仍然不清楚。因此,进一步研究并完善肺癌脑转移的发生发展机制,寻找新的有效的治疗靶点,才有望提高治疗疗效,延长患者的生存期。 脑部是一个由独特的细胞和周围血脑屏障组成,缺乏淋巴引流的高度特殊的环境。据Paget,s经典“种子与土壤”假说,成功的脑转移取决于肿瘤细胞与脑微环境二者的相互关系,涉及一系列分子的生物学功能。然而,脑转移的发展机制与相关分子目前仍知之甚少。 我们实验室前期筛选出了高潜力脑转移肺腺癌细胞株PC14/B,并发现S100B蛋白在此细胞中高表达,而在低潜力脑转移肺腺癌PC14细胞为低表达。由此推测,S100B可能与肺癌脑转移的发生发展有关。 本课题受2009年国家自然科学基金资助(项目名称:S100B在肺癌脑转移中的作用和机制研究项目编号:30973488),我们前期应用RNA干扰技术下调了PC14/B中S100B,并对其生物学改变和对肺癌脑转移的影响进行了初步研究。 目标: 本研究的目标是深入了解S100B在肺癌脑转移发生过程中的作用与机制,通过将S100B转染至低潜力脑转移肺腺癌细胞株PC14,探讨S100B对PC14细胞的生长增殖、迁移侵袭能力的影响及其初步的作用机制,揭示S100B在肺癌脑转移中发挥的生物学功能,为深入研究肺癌脑转移的发生过程及分子机制提供新的思路。 研究方法: (1)收集临床脑转移和未发生脑转移的肺腺癌患者血清,应用ELISA方法检测血清S100B的含量,分析肺癌脑转移与血清S100B含量的关系; (2)构建真核表达载体pcDNA3.1-S100B,应用脂质体法转染载体至PC14细胞,G418筛选稳定表达细胞株,通过RT-PCR、Westernblot的方法鉴定转染效率; (3)通过MTT比色法测定PC14/S100B与其对照组PC14细胞的OD值,绘制细胞生长曲线,比较转染前后细胞的增殖能力变化; (4)通过流式细胞术检测PC14/S100B与其对照组PC14细胞的细胞周期和细胞凋亡的变化; (5)通过Transwell侵袭小室检测PC14/S100B与其对照组PC14细胞的迁移和侵袭能力的变化; (6)初步探讨S100B在促PC14细胞迁移和侵袭中的作用机制。 研究结果: (1)血清S100B含量在肺癌脑转移者较未发生脑转移者高,含量别为0.048μg/l和0.015μg/l (P<0.01); (2)经RT-PCR、Western blot鉴定转染效率,G418筛选获得稳转细胞株克隆PC14/S100B; (3)通过MTT比色法,PC14/S100B细胞较其对照组PC14细胞增殖能力增强; (4) PC14/S100B细胞较其对照组PC14细胞迁移和侵袭能力均增强,Transwell小室结果分别为83.4±5.6vs53.2±3.9和53.4±4.7vs31.2±3.0(P<0.01); (5)应用流式细胞仪监测发现PC14/S100B细胞较其对照组PC14细胞凋亡受到抑制,凋亡抑制率分别为3.40±0.44%和10.90±0.67%(P<0.05),PC14/S100B细胞的细胞周期出现了G1→S期的过渡; (6)较其对照组PC14细胞,PC14/S100B细胞侵袭伪足明显伸长,细胞形态由圆形向梭形改变;Western blot结果显示IQGAP1的表达较其对照组PC14细胞明显升高(IOD值117.64vs20.569)。 结论: 前期的研究发现S100B蛋白与肺癌脑转移相关,本研究我们在细胞、蛋白以及基因水平探索了S100B在肺癌脑转移中的作用机制。 临床收集的血清标本经过ELISA检测S100B含量,结果显示为肺癌脑转移患者较未发生脑转移其含量明显升高,这一结果提示S100B在肺癌脑转移发生发展中发挥作用,可能在患者的诊断中有着重要意义;其次,转染S100B的PC14细胞增殖能力提高,凋亡减少,表明S100B的促增殖抗凋亡的作用,同时G1期细胞比例下降,S期的比例增加,这些结果进一步说明,S100B蛋白能够促进细胞增殖,加速从G1期向S期的过渡。所以我们认为增殖能力提高、凋亡减少都是肺癌脑转移的“种子”的优良“先天条件”;第三,Transwell小室实验结果证实转染S100B后的PC14细胞形态由圆形向梭形改变,并出现侵袭性伪足,同时迁移和侵袭能力均明显增强,进一步的Western blot结果显示其支架蛋白IQGAP1的表达量增多,IQGAP1正是诱导肿瘤细胞侵袭性伪足的产生及运动的重要因子,从而间接地介导肿瘤细胞的运动、迁移和侵袭。而这些能力的增强,正是肺癌脑转移发生的“必要条件”。 所以,我们认为S100B促进肺癌细胞的恶性生物学行为,促进了肺癌细胞快速的无限增殖。S100B蛋白可间接激活IQGAP1的转录和表达,并通过IQGAP1调节细胞骨架,使肺癌细胞获得更强的迁移、侵袭能力,从而在脑转移的发生发展中扮演重要角色,S100B有望成为肺癌脑转移筛查的新标记、治疗的新靶点、预后的新因子。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 张超,曹小龙,蔡小玲,郭添胜,胡家柱,黄广祥;肺癌脑转移24例临床分析[J];中国肿瘤临床与康复;2001年05期
2 偰利宇,庞瑞麟,金银慧,胡继红,田扬,李红芬;小细胞肺癌脑转移综合治疗的疗效分析[J];中国医学影像技术;2001年01期
3 王春娜,逯学梅;肺癌脑转移1例[J];包头医学院学报;2003年03期
4 牛秀茹,张丽娟,王英;肺癌脑转移32例临床分析[J];河北医药;2003年05期
5 唐芝秀;肺癌脑转移1例误诊分析[J];现代医药卫生;2004年11期
6 刘信基;吴爱珍;史玉泉;;肺癌脑转移[J];临床神经外科杂志;2006年02期
7 金琳;;肺癌脑转移病人的护理[J];家庭护士;2007年03期
8 吕扬成;吴宇平;刘劲松;王光辉;马杰科;;肺癌脑转移75例分析[J];四川肿瘤防治;2007年03期
9 杨镇华;;放疗加化疗治疗肺癌脑转移31例疗效观察[J];九江医学;2008年03期
10 吴贤;叶圣雅;;肺癌脑转移的综合治疗[J];浙江临床医学;2008年09期
11 谢志国;;肺癌脑转移36例临床分析[J];首都医药;2008年22期
12 周丽琴;刘华敏;严娜萍;;肺癌脑转移患者的放疗后护理[J];临床肺科杂志;2009年03期
13 张业全;肺癌脑转移治疗[J];中国放射肿瘤学;1987年01期
14 周德再;刘解湘;;肺癌脑转移化疗的随机对比研究[J];国外医学(神经病学神经外科学分册);1992年03期
15 苏展;预防治疗肺癌脑转移的临床探讨[J];中国疗养医学;1999年05期
16 梁荣,余忠华,杨志雄;86例肺癌脑转移治疗分析[J];肿瘤研究与临床;1999年03期
17 陈继敏;警惕肺癌脑转移[J];医药与保健;2001年11期
18 陈继敏;;警惕肺癌脑转移[J];人人健康;2002年03期
19 魏保界;26例肺癌脑转移的放射治疗[J];肿瘤;2000年02期
20 林其健;中西医结合治疗肺癌脑转移7例[J];福建中医药;2000年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张艳丽;江新梅;崔俐;王文虎;谭丽梅;;以头晕为首发症状的肺癌脑转移1例临床报道[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
2 苏志宇;;肺癌脑转移30例临床病理特点[A];第八届全国中西医结合肿瘤学术会议论文集[C];2000年
3 周成槎;;肺癌脑转移49例神经表现分析[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
4 王元纯;;肺癌脑转移—附56例分析[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
5 龙志雄;陈桂明;;肺癌脑转移的诊治新进展[A];肺癌的多学科诊治新进展[C];2005年
6 汪路明;余国伟;;30例肺癌脑转移的治疗效果分析[A];2006年浙江省胸心外科学术会议论文汇编[C];2006年
7 杨庆生;陈进哲;;5例首诊神经科的肺癌脑转移影像学诊查分析[A];中华医学会放射学分会第八届全国心胸影像学术大会暨河南省第十二次放射学术会议论文汇编[C];2006年
8 王雅棣;王秋香;景绍武;邓丽霞;刘青;程云杰;;影响肺癌脑转移疗效的多因素分析[A];中华医学会放射肿瘤治疗学分会六届二次暨中国抗癌协会肿瘤放疗专业委员会二届二次学术会议论文集[C];2009年
9 王峰;;39例肺癌脑转移放射治疗临床分析[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
10 陶玲光;解策群;;39例肺癌脑转移治疗[A];2000全国肿瘤学术大会论文集[C];2000年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 李祥攀;肺癌脑转移的立体定向治疗[D];北京协和医学院;2012年
2 庞晓雯;S100B在肺癌脑转移患者血清中含量检测及相关转移机制研究[D];第四军医大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨镇休;64例肺癌脑转移临床分析[D];广西医科大学;2010年
2 林瑜;肺癌脑转移放疗患者近期疗效和生存的影响因素[D];南昌大学;2010年
3 汪路明;30例肺癌脑转移病例的治疗效果分析[D];浙江大学;2007年
4 白皓;肺癌脑转移临床特点分析[D];第二军医大学;2007年
5 竺建芳;影响肺癌脑转移患者生存与预后因素分析[D];广西医科大学;2013年
6 张锋;β-榄香烯对肺癌脑转移放射治疗增敏作用的临床研究[D];大连医科大学;2008年
7 章玮;三种预后模型在肺癌脑转移伽玛刀治疗中的应用分析[D];浙江大学;2013年
8 胡玲;肺癌脑转移相关分子及其作用机制的研究[D];第四军医大学;2008年
9 洪芙蓉;肺癌脑转移同期加量调强放射治疗疗效及预后分析[D];福建医科大学;2013年
10 王秋香;影响肺癌脑转移疗效的多因素分析[D];河北医科大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前4条
1 南京军区南京总医院 黄文斌;肺癌脑转移的早期信号[N];家庭医生报;2005年
2 肖昌蔚 潘险峰;肺癌脑转移可似脑血管病[N];中国中医药报;2003年
3 衣晓峰;牡丹江推出延缓肺癌脑转移新方法[N];中国医药报;2001年
4 北京宣武医院胸外科主任 支修益;治癌手段多了,个性化了[N];光明日报;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978