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Ngn2和Math6在小鼠内耳不同时期表达的初步研究

朱国霞  
【摘要】:目的研究ngn2(neurogenin2)和math6在不同时期小鼠内耳的表达变化,并初步探讨其对螺旋神经元发育的作用。 方法1.本实验选取不同时期BALB/c小鼠,以E13.5、E14.5、P1、成年为观察时间点,将小鼠耳蜗固定后切片,行HE染色,识别不同时期的耳蜗结构,以便后期的进一步研究。 2.将上述不同时期的耳蜗切片进行免疫组织化学染色,了解ngn2和math6蛋白在耳蜗中的表达情况。 3.以E12.5、E13.5、E14.5、E17.5、P1、P7和成年为观察时间点,应用realtime qPCR技术检测ngn2、math6在耳蜗中mRNA的表达变化。 结果1. E13.5蜗管完成大约3/4转,平衡听觉神经节已分化为前庭神经节(VG)和螺旋神经节(SG),发育的螺旋神经节尚无神经纤维长出;E14.5耳蜗发育中的螺旋神经节开始伸出神经纤维,柱状上皮少许部分开始分化;P1耳蜗已达到成熟长度,约1.75转,发育的螺旋神经节和毛细胞形成纤维连接,底转盖膜开始形成;成年的耳蜗各形态结构清晰,内外毛细胞、盖膜等可清楚辨认。 2.免疫组织化学结果提示,在E13.5、E14.5和P1,ngn2和math6在螺旋神经节处有不同程度的阳性表达;在成年期,math6有弱表达,但ngn2几乎不表达,各组间差异有统计学意义(P0.05)。 3. Real time qPCR结果提示ngn2在E12.5d呈高表达,随后在E13.5d表达量下调,直至成年呈低水平表达;math6在E12.5-P1都呈较高水平表达,其中在P1达到高峰,随后于P7至成年表达量下调。 结论1.Ngn2在E12.5d表达呈高峰,提示其在有增殖能力的神经祖细胞中起作用;Math6在E12.5d-P1呈高表达,提示其在神经祖细胞的增殖以及分化中起重要作用;2. Ngn2和math6在耳蜗中表达的空间和时间模式的重叠和差异,提示它们在调控通路中可能受到共同的分子调控。


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1 朱国霞;Ngn2和Math6在小鼠内耳不同时期表达的初步研究[D];第四军医大学;2012年
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