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DEK、COXⅣ的表达与结直肠癌患者预后的相关性研究

张坤  
【摘要】:结肠癌(CRC)是临床治疗中最常见的恶性肿瘤之一。全世界每年有近800万新发的结肠癌病例被确诊。尽管目前对于结肠癌的治疗,已经有了长足的进步,但患者的预后,特别是转移性结肠癌(mCRC)仍然较差。而现有的临床和病理参数均不足以预测结肠癌的临床预后。因此,迫切需要探索新的分子生物标志物用以区分结肠癌不同的分子病理类型,从而进一步探索结肠癌发病机制,判断其预后,以改进治疗策略[1]。 本课题筛选了两个与结肠癌高度相关的候选基因:原癌基因DEK和线粒体数量标记分子COX IV为研究对象,分别检测了它们在结肠癌中的表达情况,并初步探讨了与结肠癌患者的预后相关性。 背景:在很多人类的侵袭性肿瘤如成人急性白血病、视网膜母细胞瘤、肝细胞癌、膀胱癌、宫颈癌、恶性脑胶质瘤、以及黑色素瘤中,DEK蛋白均呈过表达[2-10],并且与肿瘤的发生发展及化疗耐药机制有密切关联,DEK很有可能成为肿瘤生物治疗的新靶点。研究表明,在结直肠癌中,线粒体DNA编码细胞色素C氧化酶(COX)亚基的表达升高,而核DNA编码的COX IV及其临床意义的表达尚未被研究。截至目前,DEK与COX IV蛋白与结直肠癌患者的发病机制及其预后相关性的研究,文献报道甚少。 目的:通过免疫组化等技术,分析DEK和COX IV基因分别在结直肠癌患者中的表达情况及其与预后的相关性。 方法:运用免疫组化SP法,检测DEK基因在169例结直肠癌患者肿瘤组织及癌旁组织中的表达,并运用统计分析软件分析DEK表达水平与结直肠癌患者预后的相关性;在23对肠癌组织及癌旁组织,以及6个CRC细胞系中,通过实时定量PCR和Western blot的方法检测COX IV表达,运用免疫组化分析COX IV在339例CRC样品中的表达及其临床意义。 结果:DEK的表达率在结直肠癌组织85/169(50.30%)明显高于癌旁正常组织28/169(16.57%),差异具有统计学意义(P0.0001)。DEK在肿瘤组织中的表达与病人年龄、性别、肿瘤分化程度、TNM分期及肿瘤大小等因素无相关性,但与总生存率(OS)显著相关(P0.05);COX IV在mRNA和蛋白水平的表达在CRC组织中显著升高(P=0.05)。在结直肠癌细胞系中,COX IV的mRNA表达水平在各个细胞有所差异,COX IV蛋白在所有细胞系均呈阳性表达。免疫组化显示,COX IV表达在结肠癌组织中显著增加(P0.001)。卡方检验结果显示,除了性别,COX IV表达与患者临床参数之间没有显著性关联(P=0.017),COX IV表达与结直肠癌患者预后之间无显著性关联。 结论:我们的研究结果表明,DEK表达水平与结直肠癌预后密切相关,DEK表达高的结直肠癌患者预后较差; COX IV过表达,可能在结肠癌的发生中起重要作用,值得我们进一步研究。


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