收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

应用细菌表面展示技术快速筛选抗原表位及研制应急疫苗

辛忠涛  
【摘要】: 细菌表面展示技术作为噬菌体表面展示技术的有益补充,已被广泛用于生命科学各个领域。而构建基因工程减毒活疫苗是研究细菌展示系统的最初动因,也是这一系统最活跃的研究方向。但以往研究多是将已知抗原片段或表位展示于细菌表面用作实验性活菌苗。本研究提出了从细菌展示随机肽库筛选获得的抗原表位直接用作应急疫苗的新思路。 本研究首先以针对HBV pres的单克隆抗体为模型,生物淘洗商品化细菌鞭毛展示随机十二肽库,获得该抗体抗原模拟表位,核心序列为R-RG-Y,与HBV preS蛋白的135-140氨基酸同源;将展示模拟表位的菌体克隆直接免疫小鼠,可获得针对HBV preS蛋白的高滴度、高特异性抗体,表明从细菌展示随机肽库中筛选获得的抗原表位直接用于应急疫苗研制是可行的。 为克服常规生物淘洗在多抗表位筛选中的不足,以HBV preS单抗为靶分子利用FACS对模拟文库以及随机肽库FliTrx~(TM)进行筛选,在此基础上建立消减FACS分选HBV preS免疫血清多克隆抗体抗原表位的方法,为今后从病人血清样品中进行抗原表位的筛选奠定了基础。 为更好地获得不同形式抗体的抗原表位,以细菌IgA蛋白酶β结构域为骨架构建一个库容量为5×10~6的线性化随机肽库,经分析库容量与多样性均符合抗原表位筛选要求。该随机肽库是对现有细菌展示系统的有益补充。 总之,本研究以针对HBV-preS蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体为模型,建立从细菌表面展示随机肽库中快速获得抗原表位技术,并探讨这些携带模拟表位的细菌克隆直接应用作实验性活菌苗的可行性,探索一条将筛选到的抗原表位直接用于疫苗研制的技术路线,为在发生突发性的或未知类型的生物袭击时,研制应急防护疫苗进行了有益尝试。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 逯好英,徐东刚,肖定华,潘和平,王春杰;HCVC 蛋白基因在 E . coli 中的表达及其抗原表位分析[J];军事医学科学院院刊;1997年03期
2 李芳秋,严明,武建国;亲环素A抗原表位氨基酸序列及三维结构研究[J];医学研究生学报;2001年03期
3 柯屾,戚中田,温新宇,施明,赵平,沈倍奋;从随机9肽库中筛选HCV抗原表位[J];中国免疫学杂志;2002年12期
4 罗勇 ,陈受霓;植物细胞工厂和粘膜疫苗[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2004年04期
5 夏明灿,林怡,熊思东,储以微;MUC1肿瘤抗原表位PDTRP基因免疫诱导的体内外抗瘤效应[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2004年03期
6 胡族琼,赵卫,龙北国,江丽芳,郭新雄;SARS冠状病毒M蛋白二级结构和B细胞抗原表位的稳定性分析[J];广东医学;2005年05期
7 田旺 ,李正赫 ,曹学琳 ,杨文博 ,白钢;应用噬菌体随机肽库技术研究干扰素-α2b抗原表位[J];中华微生物学和免疫学杂志;2005年07期
8 关琪;王素芬;张卓然;成保平;吴薇;;B′亚型人类免疫缺陷病毒的基因序列分析[J];中国微生态学杂志;2005年06期
9 王晓红;卢海蓉;章刚;陈少娟;黄德新;李凌云;林枫;;单纯疱疹病毒II型糖蛋白G主要抗原表位的表达和抗原性检测[J];中国生物工程杂志;2007年09期
10 石宏;王洁;董福生;于利洁;王旭;顾洪涛;;抗人木糖基转移酶蛋白多克隆抗体的制备及鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年11期
11 王国锋;于孟学;薛静;李薇;曹金;;异质性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I)抗原表位在系统性硬化症中的临床研究[J];北京医学;2008年01期
12 王刚;沈柱;刘玉峰;;大疱性类天疱疮患者血清抗BP180自身抗体识别抗原表位的研究[J];实用皮肤病学杂志;2008年01期
13 闫丽萍;华荣虹;亓文宝;周艳君;李国新;于海;姜一峰;田志军;童光志;;乙型脑炎病毒E蛋白Ⅰ、Ⅱ结构域抗原表位鉴定[J];中国预防兽医学报;2010年01期
14 张志升;;基于抗原表位的血小板配型研究[J];中国输血杂志;2010年10期
15 王飞鹏;何贤辉;;3种流感病毒细胞毒T淋巴细胞抗原表位比较[J];中国公共卫生;2010年10期
16 陈娜莎;华荣虹;闫丽萍;赵付荣;王斌;杜鹃;王云峰;童光志;;乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位多肽序列鉴定及分析[J];中国预防兽医学报;2011年07期
17 吴勤学;李新宇;尹跃平;魏万惠;薛正勇;叶干运;;麻风单克隆抗体的研究:Ⅰ、抗麻风菌特异酚糖脂抗原表位的单克隆抗体的产生[J];中国麻风皮肤病杂志;1989年04期
18 张仪;曼氏血吸虫和光滑双脐螺存有共同抗原表位 Ⅰ.共同抗原表位存在于早期曼氏血吸虫的表面[J];国际医学寄生虫病杂志;1992年06期
19 刘文,陈佩丽,高大操,庄玉辉,王洪海,陈岳祥,桂晓红;结核分枝杆菌特异性抗原的N末端氨基酸序列分析[J];复旦学报(自然科学版);1998年04期
20 杨昌生 ,杨英珍 ,虞勇 ,陈灏珠 ,陈颖,施溥涛;应用合成肽研究柯萨奇B病毒衣壳蛋白VP1的共同抗原表位[J];上海免疫学杂志;1998年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 胡晓林;;B细胞抗原表位研究进展[A];天津市核学会2005年学术交流会论文汇编[C];2005年
2 周宇;王永山;范红结;欧阳伟;唐雨德;王忠灿;;IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集(下册)[C];2010年
3 李玉娇;王晶;赵慧;贾海英;李博;马秀敏;温浩;丁剑冰;;细粒棘球绦虫Eg95抗原表位的二级结构和表位预测[A];2011新型疫苗与抗体创制关键技术及质量控制研讨会论文集[C];2011年
4 黄革;王德斌;郭黎平;赵念玺;李媛媛;陆士新;;食管癌相关基因2(ECRG2)多肽C末端抗原表位在E.coli和COS-7细胞中的表达分析[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
5 王进荣;杨利国;;人卵泡抑制素α亚基抗原表位的预测[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年
6 陈书明;张秋伟;曹瑞兵;陈溥言;;鸡肾型传染性支气管炎病毒S1抗原表位富集区在毕赤酵母中的表达[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
7 林祥梅;邓俊花;李雅静;吴绍强;;南非Ⅱ型口蹄疫抗原表位筛选、表达及ELISA检测方法研究[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
8 李越希;陶开华;张锦海;黄培堂;;SARS病毒的S蛋白和N蛋白抗原表位的分析、基因合成、表达纯化及鉴定[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年
9 王凌;闭兰;张爱华;;用噬菌体随机7肽库筛选WuT4单抗人CD4 B细胞抗原表位[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
10 张兴梅;刘刚;孙曼霁;;应用组合化学新技术研究人脑乙酰胆碱酯酶的抗原表位[A];第七届全国生化药理学术讨论会论文摘要集[C];2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 辛忠涛;应用细菌表面展示技术快速筛选抗原表位及研制应急疫苗[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
2 郭爱疆;猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原表位及组织定位的研究[D];甘肃农业大学;2010年
3 商绍彬;猪圆环病毒衣壳蛋白抗原表位的精细定位与间接ELISA检测技术[D];浙江大学;2007年
4 王艳华;弓形虫代谢分泌抗原和表面蛋白1抗原表位研究[D];中国农业科学院;2011年
5 李峥;高致病性禽流感H5N1病毒血凝素蛋白中和抗原表位鉴定及其跨物种传播规律的研究[D];北京协和医学院;2009年
6 黎岳南;利用Ag43表达系统构建细菌表面嵌合重组蛋白疫苗的研究[D];海南大学;2012年
7 刘霄卉;JSRV表面蛋白抗原表位的筛选及检测试剂盒的制备[D];内蒙古农业大学;2011年
8 蔡瑞琨;高免疫原性T细胞抗原表位预测方法的研究[D];华中科技大学;2012年
9 张巍;抗人TNF-α单抗Z12识别的抗原表位研究及其人源化改造[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
10 耿宏伟;蓝舌病病毒群特异性构象抗原表位的初步鉴定及竞争ELISA检测方法的建立与应用[D];东北农业大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张志榜;猪流行性腹泻病毒膜蛋白和核蛋白抗原表位的鉴定[D];中国农业科学院;2011年
2 石晓妮;小反刍兽疫病毒H、F蛋白抗原表位的鉴定和免疫学特性研究[D];甘肃农业大学;2011年
3 邱炎;幽门螺杆菌尿素酶B抗原表位的鉴定[D];华中农业大学;2010年
4 魏刚刚;血吸虫蛋白抗原表位的预测及其在诊断抗原筛选方面的应用[D];华东理工大学;2013年
5 张婷;抗人CD40单抗5C11抗原识别表位的初步研究[D];苏州大学;2011年
6 刘畅;抗肾小球基底膜病患者血清抗体的异质性及其临床病理的相关性分析[D];郑州大学;2010年
7 陈欣;副猪嗜血杆菌的分离与单抗制备及其抗原表位鉴定[D];中国农业科学院;2011年
8 黄垭婷;日本乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体的筛选及其抗原表位的初步鉴定研究[D];四川农业大学;2011年
9 孙佳善;禽流感病毒NS1蛋白抗原表位不同筛选方法的差异分析[D];东北农业大学;2013年
10 江燕;识别构象型抗原表位抗狂犬病NP单抗研究[D];西南大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 陆志城;为AD疫苗研发带来新希望[N];医药经济报;2002年
2 肖鑫 朱晓军;抗体阴性不能排除感染丙肝[N];健康报;2003年
3 本报记者 李天舒 胡德荣;捕捉一等奖“闪光点”[N];健康报;2010年
4 胡德荣;上海:非典病毒特异性抗体制备成功[N];健康报;2003年
5 通讯员 吴志军;我国丙型肝炎疫苗研究进展获突破[N];科技日报;2003年
6 记者 刘欢;同性恋人群艾滋病感染率达7.26%[N];北京日报;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978