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SARS病原体鉴定、动物模型建立及灭活疫苗保护效果的病理学研究

王翠娥  
【摘要】:为了鉴定急性烈性传染病SARS的病原体,阐明其形态特点和侵袭过程,建 立用于SARS预防和治疗研究的动物模型并评价SARS灭活疫苗的保护效果,本 研究以实验动物和离体细胞为对象,采用多种病理学技术手段进行了系统研究, 主要结果如下: 1. 通过透射电镜在接种SARS死亡患者肺组织标本的Vero E6细胞和乳鼠肺 泡上皮细胞内发现了典型的冠状病毒。2. 接种SARS患者标本的发病乳鼠组织以 及病变的Vero E6细胞与SARS患者血清发生免疫学了反应。3. SARS冠状病毒 呈空心和实心两种状态,有散在和包涵体两种形式,以圆形和椭圆形为主,并具 有多形性的特点;动态观察证实,其在Vero E6细胞内复制迅速,且能大量增殖; 以膜融合方式侵入细胞,在细胞质内增殖,以出芽方式成熟,通过胞吐释放。4. 滴 鼻接种SARS冠状病毒可致恒河猴和食蟹猴肺脏发生间质性肺炎,且呈渐进性发 展,以感染后12~17d较明显,其病变与SARS病人肺损伤特征基本一致,只是病 变程度较轻;从鼻咽拭子标本中分离出SARS冠状病毒,经免疫组化方法在肺泡 上皮细胞、血管内皮细胞和巨噬细胞胞质内查见SARS冠状病毒,透射电镜观察 也在肺泡上皮细胞内发现冠状病毒;肺泡上皮细胞膜SARS冠状病毒受体抗体染 色阳性;肺组织超微结构损伤明显,Ⅱ型上皮细胞板层小体空化或缺如;病变部位 SP-A表达减少。5. 注射SARS灭活疫苗的食蟹猴和恒河猴在受到SARS冠状病毒 攻击后肺损伤明显减轻,且在中和抗体效价较低的情况下也未见感染增强现象。 结论:1. 本研究在国内率先通过形态学方法发现并证实了SARS冠状病毒是 SARS的病原体,其具有复制迅速、致伤快速的特点,该病毒的多形性特征提示我 们在进行病原体诊断时应引起注意。2. 恒河猴和食蟹猴可以作为SARS研究的模 型动物;SARS冠状病毒的主要靶器官是肺组织,肺损伤机制与病毒直接作用有关。 中文摘要 .SARS灭活疫苗对SARS冠状病毒的攻击有保护作用,且未引起感染增强现象。 .电镜形态学技术对新发传染病特别是病毒性疾病的病原体诊断具有重要作用; 病理学研究结果可以作为临床前评价SARS疫苗和药物效果的主要依据和指标。


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