石榴皮萃取物抗氧化和降血脂作用与成分研究
【摘要】:目的:优化石榴皮抗氧化物质的提取工艺条件;考察不同萃取组分抗氧化、降血脂效果及其可能机制;并对石榴皮提取物中一些成分进行初步分离纯化和鉴定;为充分利用和开发石榴皮提供理论指导。
方法:采用旋转中心实验设计,以丙酮浓度、液料比、提取时间为变量预测最佳工艺参数,优化粗提物最佳提取条件;进一步采用乙酸乙酯对粗提物进行了初步分级,比较分级后各组分多酚、总酮和单宁含量,为考察石榴皮萃取物的自由基清除能力,选择了′OH、DPPH′、ROO′、Cu~(2+)诱导的LDL损伤和AAPH介导的BSA氧化模型为研究对象,综合评价石榴皮萃取物体外抗氧化活性。采用SD大鼠高脂血症模型,探讨各组分降血脂效果及其可能机制;利用色谱分离技术对乙酸乙酯萃取物有关成分进行了分离纯化,结合质谱技术对所得成分进行了初步鉴定。
结果:
1.丙酮浓度和液料比对石榴皮抗氧化物质的粗提具有显著影响,粗提最佳溶剂浓度、液料比、萃取时间分别为61.2%、29.2:1(mL/g)、5.85hr。
2.石榴皮粗提物(CPE)经乙酸乙酯萃取分离后,其中的多酚和黄酮类化合物得到了重新分配,乙酸乙酯对多酚和黄酮类化合物具有富集作用,乙酸乙酯萃取物(EPE)中多酚和黄酮含量显著高于萃取前的混合物和萃取后的残留物—水萃取物(WPE)中多酚和黄酮含量,单宁类化合物在萃取前后各相中的含量无显著性差异,EPE的总抗氧化力显著高于CPE和WPE,说明乙酸乙酯对石榴皮中的有效成分起到了分离富集作用。EPE对各种自由基清除活性最强,CPE次之,WPE最差,EPE是值得深入研究的组分。
3.各组分均能显著降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C、FFA、ApoB水平和AI值,对HDL-C浓度无明显作用,对ApoAI浓度、ApoA/ApoB比值有升高作用;各组分还能显著降低高脂血症大鼠肝脏TC、TG和FFA含量,减少脂肪和胆固醇在肝脏中沉积,减轻肝脏脂肪变性程度。相比而言,EPE的效果最好,作用机制与上调血清LPL活性、促进TG代谢、加速胆固醇的逆向转运、抑制VLDL向LDL转变、