家蝇种群遗传结构对拟除虫菊酯抗性相关基因进化的影响

【摘要】：家蝇(Musca domestica)不仅是重要的卫生害虫,也是很好的模式生物,昆虫的抗药性是生物抗逆适应进化的一个特征。本研究主要对家蝇种群遗传结构对拟除虫菊酯击倒抗性kdr基因的影响进行分析,取得如下结果。 1、用特异性等位基因PCR法(PASA)检测了北京(11个种群)、天津(5个种群)、张家口(1个种群)共17个野外种群及1个实验室敏感品系的家蝇个体kdr等位基因型,野外种群的kdr基因频率在0.08～0.56,且在雌雄中分布无差异。 2、用PCR-ASO法对kdr基因型鉴定的准确度加以验证,证明此研究中PASA法假阴性率约为3%。 3、生测结果表明家蝇种群对溴氰菊酯的LD_(50)为0.013～0.238 μg/(?),抗性指数为13-到250-倍,PBO的增效指数为27-到124-倍。说明野外家蝇对拟除虫菊酯不仅存在击倒抗性也有代谢抗性。 4、回归分析表明LD_(50)为代表的溴氰菊酯抗性与kdr等位基因频率之间存在正相关关系(r_(yx)=0.8917,P=0.0001 for H_0∶r_(yx)=0)。 5、对super-kdr的检测结果表明,野外种群中未发现super-kdr点突变。 6、建立家蝇部分基因组DNA文库,以3’末端标记地高辛的寡核苷酸(GT)_8、(CAC)_5、(GATA)_4重复序列为探针,从中筛选微卫星(Microsatellite)DNA标记。在768个重组质粒中筛选到5个家蝇的微卫星DNA座位,其中4个在NCBI中注册(Accession number:AY593724,DQ004272,DQ004273,DQ004271),经检测有2个座位遗传多样性较高,在种群中的等位基因数分别为10,可作为遗传分析的分子标记。还有1个座位与已注册的果蝇微卫星序列一致。 7、用家蝇的6个微卫星位点为中性标记分析了种群遗传结构及多样性,种间基因流及种内选择压、随机遗传漂变对kdr基因频率在进化上的影响。位点连