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枸杞糖缀合物LbGp4及其糖链LbGp4-OL与小鼠B淋巴细胞结合位点的研究

谭余庆  
【摘要】:我室以往大量研究发现,口服或体外应用枸杞粗多糖不仅对正常小鼠免疫功能具有明显促进作用,而且对去胸腺、D半乳糖致衰老模型、自然衰老模型、快速老化模型及荷瘤小鼠的免疫功能低下亦具有明显改善作用。近年来,在化学研究密切合作之下,对枸杞粗多糖进行了进一步分离和纯化,获得了三个糖缀合物及相应的三个糖链,基本阐明了糖链的主要结构,即糖链LbGp1-OL的主链由β—(1→6)半乳糖组成,LbGp3-OL,LbGp4-OL的主链由β—(1→4)半乳糖组成,分支糖包括少量β—(1→3)半乳糖和大量的阿拉伯糖,末端糖均为阿拉伯糖。体外研究表明,它们均可促进小鼠脾细胞增殖反应,在等浓度条件下糖链的活性高于其来源母体糖缀合物,提示糖链是糖缀合物发挥免疫活性的重要结构基础。进一步研究发现,糖链LbGp4-OL可促进正常小鼠脾细胞产生IgG,增强裸鼠脾细胞增殖反应,但对小鼠胸腺细胞增殖反应及活化的T淋巴细胞表面抗原CD25的表达无明显的影响,提示B细胞是LbGp4-OL的主要靶细胞。本研究主要主要研究了枸杞糖缀合物LbGp4及其糖链LbGp4-OL与淋巴细胞的作用方式,探讨了其在B细胞上的特异性结合位点及其活化B细胞的初步分子机理。 一、~3H-LbGp4及~3H-LbGp4-OL与B淋巴细胞的结合 应用放射配基结合实验分别研究了~3H-LbGp4及~3H-LbGp4-OL与B淋巴细胞的结合特性。结果表明,~3H-LbGp4达到5.82 pM时与B细胞的特异性结合趋向饱和,平衡解离常数Kd=2.973 pM,亲和常数K=0.3364 pM~(-1),


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