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噬菌体作为病毒灭活指标毒株的探索研究

贴金凤  
【摘要】:消毒试验的指标微生物,应易于培养和检测、生长稳定、形态典型、对消毒因子的抵抗力在同类微生物中有代表性、对人畜无毒或弱毒。在消毒与灭菌效果评价中,指标微生物分为细菌繁殖体、分枝杆菌、细菌芽胞、真菌、病毒等。其中由于病毒试验要求高、培养时间长,特别是部分病毒还不能人工培养,因此,寻找病毒替代指标微生物一直受到广泛的关注。噬菌体是细菌的病毒,由核酸和外膜蛋白两部分组成。噬菌体的生物学特性与甲型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒相似,对消毒剂的抗力与致病性肠道病毒相似,检测方法较病毒简便,且对人不致病,因此噬菌体值得作为病毒污染和病毒灭活指示物进行研究。 在消毒和防护效果的评价指标中,需要一种既能代表病毒对常用消毒处理的抗力,又容易操作,对人安全无害的指标微生物。本课题主要通过悬液定量病毒灭活试验,研究比较了三种噬菌体与脊髓灰质病毒Ⅰ型疫苗株对外环境和三氯异氰尿酸溶液中有效氯的抗力,并以T7噬菌体为指标毒株,观察了含氯消毒剂浓度、作用时间、有机干扰物和温度等因素对灭活病毒效果的影响。主要结果总结如下: 1 三种噬菌体与脊髓灰质病毒Ⅰ型疫苗株对外环境抗力的比较 为了解噬菌体对外环境的抵抗力,采用悬液和载体定量试验方法,对F_2噬菌体、T_4噬菌体、T_7噬菌体在干燥环境和潮湿环境中的抗力进行了观察,并与脊髓灰质炎病毒作平行比较。结果,在温度20℃、相对湿度8%—14%的干燥环境中,布片上脊髓灰质炎病毒—1型疫苗株,于生物安全柜中放置2h,病毒滴度下降5个对数值;f2噬菌体、T4噬菌体和T7噬菌体在同样条件下放置72h其滴度分别下降1.98、3.43、2.83;在干燥的布片上,三种噬菌体与脊髓灰质病毒Ⅰ型疫苗株


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