噬菌体作为病毒灭活指标毒株的探索研究

【摘要】：消毒试验的指标微生物，应易于培养和检测、生长稳定、形态典型、对消毒因子的抵抗力在同类微生物中有代表性、对人畜无毒或弱毒。在消毒与灭菌效果评价中，指标微生物分为细菌繁殖体、分枝杆菌、细菌芽胞、真菌、病毒等。其中由于病毒试验要求高、培养时间长，特别是部分病毒还不能人工培养，因此，寻找病毒替代指标微生物一直受到广泛的关注。噬菌体是细菌的病毒，由核酸和外膜蛋白两部分组成。噬菌体的生物学特性与甲型肝炎病毒、脊髓灰质炎病毒相似，对消毒剂的抗力与致病性肠道病毒相似，检测方法较病毒简便，且对人不致病，因此噬菌体值得作为病毒污染和病毒灭活指示物进行研究。 在消毒和防护效果的评价指标中，需要一种既能代表病毒对常用消毒处理的抗力，又容易操作，对人安全无害的指标微生物。本课题主要通过悬液定量病毒灭活试验，研究比较了三种噬菌体与脊髓灰质病毒Ⅰ型疫苗株对外环境和三氯异氰尿酸溶液中有效氯的抗力，并以T7噬菌体为指标毒株，观察了含氯消毒剂浓度、作用时间、有机干扰物和温度等因素对灭活病毒效果的影响。主要结果总结如下： 1 三种噬菌体与脊髓灰质病毒Ⅰ型疫苗株对外环境抗力的比较 为了解噬菌体对外环境的抵抗力，采用悬液和载体定量试验方法，对F_2噬菌体、T_4噬菌体、T_7噬菌体在干燥环境和潮湿环境中的抗力进行了观察，并与脊髓灰质炎病毒作平行比较。结果，在温度20℃、相对湿度8％—14％的干燥环境中，布片上脊髓灰质炎病毒—1型疫苗株，于生物安全柜中放置2h，病毒滴度下降5个对数值；f2噬菌体、T4噬菌体和T7噬菌体在同样条件下放置72h其滴度分别下降1.98、3.43、2.83；在干燥的布片上，三种噬菌体与脊髓灰质病毒Ⅰ型疫苗株