收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

分枝杆菌噬菌体D29气溶胶特性和动物气溶胶暴露系统的初步研究

温占波  
【摘要】: 面对全球严峻的结核病耐药状况,到目前为止,还没有理想的新型抗结核药物进入临床应用,人类急需发现新的药物作用靶点、新的药物筛选模型以致最终完成新型的抗结核药物研制。分枝杆菌噬菌体具有裂解结核分枝杆菌的作用,具有治疗结核病的潜在价值,能否成为一个抗结核病的新药,也倍受关注。结核病最常见的感染脏器为肺脏,目前已有的噬菌体治疗结核分枝杆菌研究的给药方式为皮下注射、滴鼻途径,噬菌体到达肺脏的有效剂量低,如果采用气溶胶吸入给药途径,可能效果会更好,分枝杆菌噬菌体气溶胶吸入治疗结核分枝杆菌是一个值得深入研究的领域。 噬菌体D29气溶胶的粒子大小、粒径分布以及耐雾化能力是其能否使用气溶胶吸入给药治疗的关键。DV40发生器不同介质发生的气溶胶动力学直径为0.8微米左右。TSI3321测试的噬菌体D29气溶胶总粒子空气动力学直径为0.872微米,Anderson六级采样器采集的生物粒子气溶胶的质量中值直径为2.21微米,噬菌体D29在喷雾流量10L/min,压力1.8kg/cm2,发生液介质为PBS磷酸盐缓冲液的条件下雾化30分钟存活率为48.86%、雾化60分钟存活率为30.12%,具有较强的耐雾化能力。每分钟的喷雾量为232μl。在此条件下产生的气溶胶生物粒子的质量中值直径为2.21微米,可以进入肺脏,在此条件下发生的气溶胶可以满足动物气溶胶吸入研究的要求。AGI-10液体冲击式采样器加入消泡剂橄榄油后可以提高噬菌体D29的耐冲击能力,但噬菌体D29的绝对数量比不加的要少,因此AGI-10液体冲击式采样器采样时不加消泡剂橄榄油。 传统的结核分枝杆菌噬菌体D29的定量检测方法为双层琼脂培养法,从宿主菌的培养到双层琼脂培养计数,即使使用快速生长耻垢分枝杆菌作为宿主菌,整个过程也要4-5天,快速检测方法对于噬菌体D29气溶胶治疗结核分枝杆菌的相关研究具有重要意义。SYBR greenⅠ荧光染料方法简便易行、价格便宜。Ct值(Y)和对数浓度lgN(X)的直线方程为:Y=-3.08X+37.46,误差为0.026,相关系数为-0.996。本研究中气溶胶样本QPCR的检测结果是双层琼脂计数法的78.19倍,QPCR检测结果明显高于培养法的结果。而在噬菌体D29新鲜的液体样本中QPCR法和培养法的符合性较好。检测的灵敏度为10~1PFU/反应。QPCR方法可以大大提高定量速度,从采集样本到得到检测结果只要3-4小时。 气溶胶吸入治疗、免疫及药效评价的实验室研究离不开动物气溶胶暴露技术平台,该技术平台是上述研究工作的基础。呼吸道气溶胶吸入是病原微生物感染的重要途径,气溶胶吸入病原微生物往往产生不同于传统感染途径的病症,病情严重,且传统疫苗对吸入感染的保护效果较差。研制新型有效的疫苗和治疗药物需要病原微生物气溶胶攻毒感染途径,建立病原微生物气溶胶感染动物模型。目前市场上只有动物全身暴露气溶胶系统,由于全身暴露的种种缺陷,研究人员更多的使用动物口鼻气溶胶暴露系统。由于动物口鼻暴露系统的工艺较复杂,且属于多学科交叉,目前各研究单位如:美国陆军传染病研究所使用的全自动生物气溶胶暴露系统全部为自制。为了建立动物气溶胶暴露技术平台,满足动物气溶胶感染、暴露动物实验的需要。建立了由洁净压缩空气系统、气溶胶发生系统、补气系统、气溶胶采样分析系统、动物暴露装置、污染气流净化系统等组成的动物口鼻气溶胶暴露技术平台。 对建立的动物气溶胶暴露系统,进行了所有气溶胶粒子和生物气溶胶粒子分布是否均匀的评价。使用粘质沙雷氏菌8039和噬菌体D29气溶胶,TSI3321气溶胶测试仪测试了所有粒子分布情况,微生物采样器检测生物粒子气溶胶的分布情况,无论生物粒子气溶胶还是所有粒子气溶胶的采样结果表明暴露装置上下层和每层各暴露口之间气溶胶浓度差异不显著。对各种微生物气溶胶浓度的采样方法进行了研究,发生高浓度微生物气溶胶时,由于浓度过高,超出了Anderson六级采样器的定量限度,应使用AGI-10液体冲击式采样器;发生中浓度气溶胶,Anderson六级空气微生物采样器的采样结果显著高于AGI-10液体冲击式采样器,应使用Anderson六级空气微生物采样器。由于AGI-10液体冲击式采样器的采样流量只有7升/min,发生低浓度气溶胶时,采样时间过长会对微生物具有较大损伤,AGI-10不适用于低浓度微生物气溶胶采样,应使用Anderson六级空气微生物采样器进行采样检测。发生高浓度粘质沙雷氏菌8039和噬菌体D29气溶胶时,在暴露装置的周围放置沉降平板,沉降平板未见相应微生物的生长,结果表明在使用高浓度模拟微生物进行气溶胶评价时未发生气溶胶泄露。 本研究对噬菌体D29气溶胶的特性参数进行了研究,并建立了噬菌体D29气溶胶的QPCR检测方法。建立了动物口鼻气溶胶暴露技术平台,模拟细菌、病毒气溶胶分布均匀,各暴露口浓度差异不显著。高浓度气溶胶暴露时模拟微生物气溶胶未发生泄露。对各种浓度的微生物气溶胶采样方法进行了研究,为下一步噬菌体D29气溶胶吸入治疗的动物实验奠定了基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 应波;气溶胶粒子的光吸收作用:累积夹层技术与光谱观测的相互比较[J];国外医学.卫生学分册;1990年06期
2 车凤翔;消毒剂气溶胶粒子大小测定法[J];中国消毒学杂志;1984年04期
3 闫效珊;龚诒芬;赵月堂;吴德昌;;大鼠吸入气溶胶装置的设计及其性能检验[J];军事医学科学院院刊;1979年01期
4 陈志慧;张箐;;麻疹减毒活疫苗的气溶胶免疫[J];国际生物制品学杂志;1984年05期
5 宋清林;;微生物气溶胶免疫的有关情况[J];人民军医;1977年09期
6 黄国华;;肺泡微环境与沉积肺泡中的气溶胶的存留和向血转移的关系[J];国际放射医学核医学杂志;1978年04期
7 李越希;李逸民;;气溶胶在动物体内沉积的测定方法[J];国外医学.卫生学分册;1991年04期
8 车凤翔;微生物气溶胶的衰亡(文献综述)[J];中国消毒学杂志;1984年03期
9 魏兰芬;张磊;许激;潘协商;朱一凡;林军明;;生物气溶胶粒径分布及稳定性研究[J];中国消毒学杂志;2011年02期
10 刘克洋;李劲松;;气溶胶沉降模拟方法研究进展[J];军事医学;2011年08期
11 刘克洋;李劲松;;气溶胶粒子在呼吸道沉降的计算机流体动力学模拟方法研究进展[J];军事医学;2011年02期
12 Dudley RE;武在炎;;DTPA自猎狗呼吸道的吸收[J];国际放射医学核医学杂志;1981年02期
13 赵超;张磊;郭秋菊;卓维海;;室内氡子体有效剂量转换系数的影响因素分析[J];辐射防护;2011年04期
14 苏昆源;对ICRP关于吸入放射性气溶胶的胃肠放射性活度的阐释[J];国际放射医学核医学杂志;1984年02期
15 俞海泉;马文彬;顾明元;杨树栋;;加压舱内使用的并联同步雾化给药装置[J];中国医疗器械杂志;1982年02期
16 金其镛;;国外酸雨研究的进展[J];江汉大学学报(自然科学版);1986年02期
17 罗明泉;滤膜捕集氡子体[J];国际放射医学核医学杂志;1982年01期
18 高平印;日本地表空气中的钚[J];国际放射医学核医学杂志;1985年03期
19 拓飞;徐翠华;;用TSI 3321 APS分析大气气溶胶浓度和粒径分布[J];中国辐射卫生;2009年04期
20 ;放射卫生学[J];国际放射医学核医学杂志;1977年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙玉稳;李云川;孙云;张杏敏;邓郁鹏;齐作辉;姜岩;赵志军;董晓波;;石家庄地区春季霾天下气溶胶粒子的观测分析[A];第27届中国气象学会年会大气物理学与大气环境分会场论文集[C];2010年
2 王鹏;王晨晟;张智杰;洪普;王群;;武汉地区气溶胶光学性质与空气质量的相关性研究[A];中国光学学会2010年光学大会论文集[C];2010年
3 石广玉;陈林;秦世广;陈焕森;;北京奥运期间气溶胶粗粒子显著降低[A];北京论坛(2008)文明的和谐与共同繁荣——文明的普遍价值和发展趋向:“生态文明:环境、能源与社会进步”环境分论坛论文或摘要集[C];2008年
4 张爱群;蔡青;张金月;郭月虹;刘林;郭秀莲;谢贵仲;张春波;阎显荣;;北京地区雾霾趋势及趋势[A];第27届中国气象学会年会气候环境变化与人体健康分会场论文集[C];2010年
5 韩道文;刘文清;张玉钧;陆亦怀;刘建国;赵南京;;影响气溶胶质量浓度垂直分布的气象因素分析[A];光子科技创新与产业化——长三角光子科技创新论坛暨2006年安徽博士科技论坛论文集[C];2006年
6 孙霞;银燕;孙玉稳;石立新;段英;吴志会;;邢台市一次霾过程的气溶胶特征分析[A];第27届中国气象学会年会大气物理学与大气环境分会场论文集[C];2010年
7 张天航;银燕;;石家庄地区一次淡积云飞机探测资料分析[A];第27届中国气象学会年会大气物理学与大气环境分会场论文集[C];2010年
8 杨军;牛忠清;石春娥;刘端阳;李子华;;雾霾过程演变与气溶胶粒子微物理特征[A];第28届中国气象学会年会——S9大气物理学与大气环境[C];2011年
9 李学杉;徐青山;胡顺星;胡欢陵;;利用气溶胶消光特性来反演气溶胶折射率[A];光子科技创新与产业化——长三角光子科技创新论坛暨2006年安徽博士科技论坛论文集[C];2006年
10 郝立庆;王振亚;张为俊;黄明强;方黎;王思胜;田振玉;孔蕊弘;单晓斌;张允武;盛六四;;乙苯的光物理和光化学特性研究[A];光子科技创新与产业化——长三角光子科技创新论坛暨2006年安徽博士科技论坛论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王希影;气溶胶粒子光学常数的实验研究及辐射传输的数值模拟[D];哈尔滨工业大学;2012年
2 牛红亚;区域大气边界层内气溶胶粒子的单颗粒法解析[D];中国矿业大学(北京);2011年
3 封彩云;城市污染大气环境下云和降水形成的观测与数值模拟研究[D];兰州大学;2011年
4 马丽珍;自由空间量子通信中偏振光子传输和操控的理论与模拟研究[D];中国海洋大学;2010年
5 王友君;典型室内外环境空气污染特性研究[D];东华大学;2012年
6 钟山;基于纯转动Raman激光雷达系统的大气温度和气溶胶的探测及测风边缘技术的性能比较[D];武汉大学;2012年
7 李惠彬;高氡环境下钚气溶胶连续监测技术研究及设备研制[D];清华大学;2013年
8 武艳;微波辐射与低温等离子体对生物气溶胶活性的影响及其机理[D];北京大学;2013年
9 苏婧;中国西北地区沙尘气溶胶辐射强迫效应的研究[D];兰州大学;2010年
10 曹贤洁;兰州地区气溶胶辐射特性观测研究[D];兰州大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 汤双庆;非球形混合气溶胶紫外和可见光的传输与散射特性[D];西安电子科技大学;2010年
2 屈丽娜;K型、S型气溶胶抑制瓦斯爆炸实验研究[D];西安科技大学;2010年
3 齐冰;杭州地区霾特征及气溶胶物理特性观测研究[D];南京信息工程大学;2013年
4 安礼政;东亚夏季风环流与气溶胶的相互作用[D];南京大学;2013年
5 刘兵;辐射传输的积分方程法模拟及气溶胶粒子辐射特性研究[D];哈尔滨工业大学;2010年
6 王宁宁;气溶胶对雷暴云电荷结构影响的数值模拟研究[D];南京信息工程大学;2012年
7 王梦;郑州市春节期间气溶胶污染物的变化规律研究[D];河南师范大学;2013年
8 鹿化文;大气辐射传输的数值模拟及气溶胶粒子辐射特性实验研究[D];哈尔滨工业大学;2011年
9 汪坤;大气浑浊度检测方法研究及装置设计[D];南京信息工程大学;2011年
10 刘晓燕;湿式除尘中液滴对气溶胶粒子捕集效率的影响[D];东华大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 贾巴尔;大气污染影响全球能见度[N];中国环境报;2009年
2 林晶晶;灰霾 缠绕城市的梦魇[N];人民日报海外版;2010年
3 许黎 李灿;大气气溶胶及其气候环境效应[N];中国气象报;2003年
4 杨绮薇 戴随刚 单丽静 周芳;气象专家:《后天》让我们警醒[N];中国气象报;2004年
5 本报记者 杨兴云;灰色深圳[N];经济观察报;2009年
6 本版撰文 本报记者 杨升华;天空灰蒙蒙市民受困扰[N];信息时报;2003年
7 新华社记者 李韧;雾都之雾淡了,却脏了[N];新华每日电讯;2003年
8 本报记者 廖影 通讯员 马力;“会诊”山城轻雾[N];中国气象报;2002年
9 记者 魏静 见习记者 苏梓琴 通讯员 代帅;长沙遭遇“霾”伏[N];大众卫生报;2009年
10 冯昊 记者 高开升;餐饮业油烟污染成社会公害[N];鞍山日报 ;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978