收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

温敏性壳聚糖水凝胶携带棕色脂肪干细胞治疗大鼠心梗的研究

石金鑫  
【摘要】:急性心肌梗死在我国的发病率及死亡率居高不下。AMI引起大量心肌细胞的坏死及凋亡,导致心脏过度负荷,从而引起心力衰竭。心脏自身再生能力有限,无法替代流失过多的心肌细胞。干细胞是近年来心脏修复与再生研究的焦点,具有自我更新与多向分化潜能。大量的研究证实,干细胞能够提高心脏功能,促进心肌再生。 棕色脂肪来源干细胞(Brownadipose-derived mesenchymal stemcells,BADSCs)是近年来的一种新的种子细胞来源,具有高度心肌分化能力,并具有一定的旁分泌潜能,且具有低免疫原性可自体移植等优点,逐渐被用来研究治疗心肌梗死。温敏性壳聚糖水凝胶是一种优良的可注射性支架材料,具有良好的生物相容性与可降解性,已被证实能够应用于心肌组织工程修复心肌梗死。 本研究首先体外添加壳聚糖产物培养BADSCs,观察产物对细胞分化的影响并进一步探讨相关促分化机制;并对BADSCs进行Flu-mRFP基因慢病毒转染。在此基础上,以温敏性壳聚糖水凝胶作为载体携带BADSCs心梗部位移植,检测其心梗的修复能力,并与单纯移植的BADSCs在心肌分化能力上进行比较验证。 本论文主要包括以下三部分内容: 第一部分:BADSCs体外分离、分选、培养、标记及生物学特性 BADSCs主要来源于棕色脂肪组织。通过联合酶消化法分离大鼠肩胛骨下脂肪组织,获得棕色脂肪干细胞(BADSCs),利用流式细胞术、免疫荧光等技术对BADSCs进行分选、表型鉴定及成心肌分化鉴定。将携带荧光素酶(Fluc)、单体红色荧光蛋白(mRFP)双报告基因的慢病毒转染BADSCs,并鉴定两种报告基因的表达。结果表明1)流式细胞仪显示分选后的BADSCs表达CD133、CD90、CD34阳性,CD45阴性;2)BADSCs能够自发心肌分化,免疫荧光鉴定心肌标记物阳性;3)慢病毒转染后的BADSCs表达Fluc-mRFP报告基因。 第二部分:温敏性壳聚糖水凝胶的制备及促心肌分化现象与机制的研究 在培养基中添加壳聚糖降解产物,观察其产物对BADSCs心肌分化的影响;并在此基础上,对壳聚糖降解产物D-Glu与N-AC-Glu促BADSCs心肌分化作用机制进行了初步探讨。结果表明D-Glu、N-AC-Glu能够促进BADSCs心肌分化,并通过增加胞外胶原的合成而促进这一作用。 第三部分:温敏性壳聚糖水凝胶携带BADSCs心梗移植的实验研究 体外制备壳聚糖水凝胶,构建大鼠心梗模型,将其随机分为4组,PBS组(单纯注射PBS100μL)、Chitosan组(单纯注射壳聚糖水凝胶100μL)、BADSCs组(注射4×106BADSCs+PBS100μL)、BADSCs+Chitosan组(注射4×106BADSCs+壳聚糖水凝胶100μL)。利用活体生物发光成像技术追踪移植细胞在大鼠心梗环境下的滞留与存活情况;心脏超声及MASSON染色用来评估心功能的恢复情况;免疫荧光染色检测BADSCs体内分化情况,并对BADSCs组、BADSCs+Chitosan组体内心肌分化能力及心梗修复能力进行比较。结果表明,温敏性壳聚糖水凝胶改善了心梗微环境下BADSCs的滞留与存活,BADSCs复合壳聚糖水凝胶移植后显著地增加了微血管密度、心肌分化,并有效的改善了心功能。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 孙斌;刘洪臣;;可注射温敏壳聚糖/甘油磷酸钠基水凝胶在医学中应用进展[J];中华老年口腔医学杂志;2011年01期
2 赵朋;郑化;邓超;齐文静;田倩;陈敬华;;壳聚糖与聚乙二醇交联水凝胶研究[J];高分子通报;2010年11期
3 叶菁芸;曾戎;屠美;赵剑豪;;基于溶剂置换的壳聚糖水凝胶的构建及力学性能研究[J];功能材料;2011年08期
4 李忠;杨柳;戴刚;王东武;谭美云;王富友;金旭红;;骨髓间充质干细胞在壳聚糖凝胶中体外三维培养的实验研究[J];四川医学;2006年12期
5 赵小萍;王豫;邱海燕;王晓博;;pH敏感性尼莫地平水凝胶的制备及其性能研究[J];现代生物医学进展;2009年17期
6 王华明;曹阳;徐龙;卢凌彬;;可注射型海藻酸钙-壳聚糖复合材料的凝胶性能研究[J];材料导报;2009年06期
7 王华明;王江;;壳聚糖伤口敷料的研究进展[J];华南热带农业大学学报;2007年02期
8 李偏;冯进益;蔡志刚;谢容泉;王德荫;郑立斌;芮钢;;温敏性壳聚糖水凝胶对大鼠成骨细胞的毒性[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年25期
9 刘静;;组织工程生物绷带及敷料在创伤修复领域中的应用[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年03期
10 陈美玲;岳凌;魏召阳;杨占山;;单甲氧基聚乙二醇接枝壳聚糖温敏性水凝胶的制备及其性能表征[J];苏州大学学报(医学版);2011年01期
11 王爱勤,薛佐良,赵生敏,曹农,贾宝全;医用壳聚糖膜的制备与性能研究[J];北京生物医学工程;1996年01期
12 吴清基,徐笑非,陈仲林,王鹤忠;壳聚糖敷料在创伤中的新应用[J];东华大学学报(自然科学版);1996年01期
13 王爱勤,肖玉方,曹农,贾宝全,薛佐良;壳聚糖的改性和应用研究[J];中国生化药物杂志;1997年01期
14 陈章荣,徐开俊,吴洪元,程宇镳;壳聚糖对黄芩煎煮液的絮凝作用[J];中国药科大学学报;1999年03期
15 李沁华,孙娜;多孔壳聚糖膜材料的制备及性能研究[J];生物医学工程学杂志;1999年S1期
16 方华丰,唐爱军,赵国有,殷斌志,周宜开;壳聚糖处理水中三氯甲烷的研究[J];环境导报;2000年01期
17 陈超群,任林,吴移谋,薛金花;壳聚糖对小鼠肠道菌群的影响[J];实用预防医学;2000年06期
18 戚晓红,蒋莉,李晓宇,李跃华,吴翠贞;壳聚糖对实验性脂肪肝大鼠肝及线粒体的体视学分析[J];中国生化药物杂志;2001年01期
19 ;壳聚糖“富贵病”的“克星”[J];招商周刊;2003年Z1期
20 赵海霞,牟大可;甲壳素/壳聚糖及其衍生物的应用研究进展[J];山东医药;2004年17期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨黎明;施丽莉;陈捷;王胜;张震德;夏义本;;辐照法制备壳聚糖/聚丙烯酸水凝胶及其溶胀性能研究[A];第6届辐射研究与辐射工艺学术年会论文集[C];2004年
2 丘雪莹;陈新;;温敏性壳聚糖水凝胶体系凝胶机理的研究[A];2009年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(下册)[C];2009年
3 叶林静;魏彦林;陈亚芍;;载银过氧化物壳聚糖水凝胶的制备[A];中国化学会第27届学术年会第13分会场摘要集[C];2010年
4 张建兰;高玲香;;钛酸钡/壳聚糖明胶复合水凝胶电场响应性能研究[A];中国化学会第十三届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2011年
5 李昕;李保强;周玉;;多尺度仿骨结构壳聚糖水凝胶的按需构建及力学性能研究[A];2011中国材料研讨会论文摘要集[C];2011年
6 汪连生;丁宏谦;管志全;;壳聚糖接枝聚乙醇酸共聚物水凝胶的制备与溶胀性能[A];2005年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2005年
7 黄宇彬;;壳聚糖-白蛋白pH敏感型水凝胶的合成与性能研究[A];2007年全国高分子学术论文报告会论文摘要集(下册)[C];2007年
8 尹学琼;林强;张岐;;壳聚糖及其铜配合物对超氧阴离子的清除活性研究[A];加入WTO和中国科技与可持续发展——挑战与机遇、责任和对策(下册)[C];2002年
9 邝钜炽;;壳聚糖阻垢性能的研究(英文)[A];中国化学会第七届水处理化学大会暨学术研讨会会议论文集[C];2004年
10 李瑞欣;张西正;武继民;郭勇;郭春;李志宏;关静;黄姝杰;;成型工艺对壳聚糖导管材料力学性能的影响[A];2008年全国生物流变学与生物力学学术会议论文摘要集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 甄勇;应用组织工程材料栓塞动脉瘤的实验研究[D];吉林大学;2009年
2 孙斌;可注射温敏壳聚糖/胶原/甘油磷酸钠水凝胶应用于骨组织工程的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
3 陈惠萍;壳聚糖调控不结球白菜叶片氨同化关键酶作用机理初探[D];南京农业大学;2004年
4 尹太;血管组织工程的初步实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2005年
5 王志华;环境样品中污染物分析与处理的研究[D];北京化工大学;2001年
6 范金石;甲壳低聚糖类表面活性剂的制备及其性能研究[D];青岛海洋大学;2002年
7 樊李红;壳聚糖海藻酸盐生物医用材料的研制与功能特性[D];武汉大学;2005年
8 张永勤;强制渗透法制备水溶性壳聚糖及其固定化酶解方法与产物研究[D];中国海洋大学;2005年
9 李保强;壳聚糖/羟基磷灰石仿生骨材料的研究[D];浙江大学;2005年
10 杨琰;叶酸修饰壳聚糖小干扰RNA纳米粒靶向逆转卵巢癌多药耐药的研究[D];华中科技大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 晋治涛;羧甲基壳聚糖水凝胶和羧甲基壳聚糖盐的制备、性质及其应用研究[D];中国海洋大学;2004年
2 张启凤;羟丙基壳聚糖及其水凝胶的理化性能和药物缓释应用研究[D];中国海洋大学;2003年
3 杨少华;PVP/壳聚糖接枝共聚水凝胶的合成与性能研究[D];广东工业大学;2004年
4 江磊;改性壳聚糖水凝胶的制备、结构及性能研究[D];广西大学;2007年
5 李芊竹;壳聚糖衍生物水凝胶的合成和性能表征[D];北京化工大学;2009年
6 唐金春;可溶性碳纳米管改性物的制备及其水凝胶载药性能的研究[D];中南大学;2008年
7 石金鑫;温敏性壳聚糖水凝胶携带棕色脂肪干细胞治疗大鼠心梗的研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2013年
8 张琨;SA/GT/CS复合水凝胶微球的结构与性能研究[D];西南交通大学;2009年
9 李剑铮;蛋白质结合型生物活性水凝胶的制备和性能研究[D];吉林大学;2007年
10 胡和兵;两性壳聚糖/季胺化壳聚糖复合物水凝胶及其对BSA的释放行为[D];浙江大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 玲玲;中科院发现壳聚糖废水可回收虾青素[N];医药经济报;2008年
2 王彤;壳聚糖有效预防术后粘连[N];医药经济报;2004年
3 江晓霞 陈智华 张晓晖;壳聚糖对动物体的影响及在饲料中的应用[N];中国畜牧兽医报;2009年
4 潘以楼 杨敬辉 宋立妹;壳聚糖和菇类蛋白多糖[N];江苏农业科技报;2008年
5 张光华 杨建洲;壳聚糖应用日趋广泛[N];中国化工报;2000年
6 本报记者 王延斌 通讯员 胡建廷;15年的等待[N];科技日报;2010年
7 陈列欢;预防糖尿病,海洋来帮忙[N];医药经济报;2004年
8 记者 李学华;南非用螃蟹壳制造新型绷带[N];科技日报;2010年
9 长江;壳聚糖加钙保鲜水蜜桃[N];江苏农业科技报;2004年
10 本报记者 马永刚;潍坊海之源生物制品创造健康新生活[N];中国食品报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978