收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

重组人甲状旁腺素对骨关节炎的作用及机制研究

杨磊  
【摘要】:实验目的:1、观察重组人甲状旁腺素(Recombinant Human Parathyroid Hormone,PTH1-34)对小鼠手术诱导的不同时期骨关节炎(osteoarthritis,OA)的影响并探索其机制;2、观察PTH1-34对1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus,T1DM)小鼠手术诱导的早期骨关节炎的影响。实验方法:第一部分:重组人甲状旁腺素对小鼠不同时期骨关节炎的作用差异1.C57BL/6J小鼠随机分组,右下肢内侧半月板切除术(medial meniscectomy,MM)诱导小鼠骨关节模型,对侧肢体做假手术(sham)处理,按计划分别予生理盐水、PTH1-34溶液腹腔注射,并按时处死小鼠取材;2.使用Micro CT扫描三维重建观察小鼠关节软骨下骨骨量及结构改变;3.小鼠取材标本脱钙、脱水处理后常规石蜡包埋并制备4μm石蜡切片;4.采用HE染色观察关节软骨细胞及软骨下骨改变;5.利用番红0-固绿染色观察关节软骨及软骨基质改变,利用国际骨关节炎学会(Osteoarthritis Research Society International,OARSI)推荐的组织病理学评分对小鼠骨关节炎进行评分;6.进行免疫组织化学染色检测1型甲状旁腺素受体(PTHR1)、血管内皮生长因子(VEGF)、成骨细胞标志物核心结合因子2(RUNX2),基质金属蛋白酶13(MMP-13)的表达水平;第二部分:重组人甲状旁腺素对1型糖尿病小鼠早期骨关节炎的保护作用1.1型糖尿病(Type 1 diabetes mellitus,T1DM)小鼠模型建立:十二周龄C57BL/6J小鼠禁食(自由饮水)14 h,腹腔注射1%链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)溶液4.5μL/g,每日1次,连续6 d,建模完成1周后测小鼠空腹血糖,小鼠空腹血糖连续3 d超过250 mg/dL认为T1DM模型成功建立;2.小鼠随机分组,采用创伤不稳定的内侧半月板(destabilization of the medial meniscus,DMM)手术合并内侧半月板部分切除术诱导小鼠膝关节OA模型;干预组小鼠腹腔注射PTH1-34溶液,按时处死小鼠取材;3.使用Micro CT扫描三维重建观察小鼠关节软骨下骨骨量及结构改变;4.小鼠取材标本脱钙、脱水处理后常规石蜡包埋并制备4μm石蜡切片;5.采用HE染色观察关节软骨细胞及软骨下骨改变;6.利用番红0-固绿染色关节软骨及软骨基质改变,利用国际骨关节炎学会(Osteoarthritis Research Society International,OARSI)推荐的组织病理学评分对小鼠骨关节炎进行评分;实验结果:一、PTH1-34在早期抑制小鼠OA进展,在晚期促进小鼠关节破坏1.手术诱导的小鼠骨关节炎随病程不断进展,软骨下骨的骨量在骨关节炎进展早期降低,而在晚期增加。与盐水治疗组相比,在术后立即进行PTH1-34干预可增加关节软骨下骨骨量并抑制关节软骨退变;2.在术后6周进行PTH1-34干预,小鼠关节软骨下骨量进一步增加,与此同时小鼠关节软骨退变破坏明显加重;3.免疫组织化学染色表明血管内皮生长因子(VEGF)、成骨细胞标志物核心结合因子2(RUNX2)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)等在关节软骨中的表达水平与关节软骨的破坏水平呈正相关。二、PTH1-34延缓T1DM小鼠OA早期软骨下骨量降低并抑制OA进展1.与血糖正常小鼠手术诱导OA 3周时相比,T1DM小鼠手术诱导OA 3周时关节软骨下骨量进一步下降,关节软骨破坏程度更严重;2.术后立即进行PTH1-34干预可改善T1DM小鼠关节软骨下骨骨量丢失,并改善关节软骨的破坏。结论:一、在OA早期伴有软骨下骨骨量降低,早期使用PTH1-34后可逆转小鼠OA早期软骨下骨骨量丢失并抑制软骨退变;在OA晚期应用PTH1-34干预促进了软骨破坏。这提示临床应用PTH1-34及相关制剂治疗骨关节炎应具体评估利弊,需要慎重选择。二、T1DM可加速骨量的丢失并促进OA早期进展,使用PTH1-34后可逆转T1DM小鼠OA早期软骨下骨骨量丢失,在T1DM OA发生早期起到保护作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前18条
1 高杨;张明;宫春梅;;甲状旁腺素及其受体对成釉细胞增殖的影响[J];潍坊医学院学报;2015年04期
2 柳洪宙;李春霖;;钙磷代谢紊乱概述[J];人人健康;2016年22期
3 刘昭;;院前甲状旁腺素检查正常的甲状旁腺功能减退1例[J];罕少疾病杂志;2013年04期
4 程速远;李晶;梁成罡;;RP-HPLC法测定注射用重组人甲状旁腺素含量[J];药物分析杂志;2011年06期
5 刘新杰;周文斌;周冬仙;邙建波;麦沛成;;术中快速测定甲状旁腺素的临床意义[J];实用临床医学;2007年04期
6 毕琳琳;文爱东;罗晓星;贾艳艳;周敏;杨志福;;注射用重组人甲状旁腺素(1-34)在健康人体的药代动力学[J];中国临床药理学杂志;2007年04期
7 吴浩;;重组人甲状旁腺素治疗骨质疏松症的研究进展[J];中国新药与临床杂志;2006年04期
8 刘新杰;周冬仙;;术中快速测定甲状旁腺素的临床应用[J];国际外科学杂志;2006年06期
9 曾文珊,刘景晶,杨仲元,徐康森;重组人甲状旁腺素1-34胰蛋白酶切肽图谱分析[J];中国药科大学学报;2005年01期
10 许莲娥,张中书,施益群,赵技文,王国洪,许瑞吉;老年各种疾病与甲状旁腺素的关系[J];实用老年医学;1998年02期
11 汪良;原发性甲状旁腺功能亢进的甲状旁腺素完整肽链测定及其诊断价值[J];国外医学.外科学分册;1990年04期
12 徐志惠,季冠芳,苏学良,方佩华,谭郁彬;合成的人血浆甲状旁腺素(1-34)放射免疫测定法及其临床应用[J];中华内分泌代谢杂志;1992年03期
13 林宝婉;甲状旁腺功能减退[J];实用内科杂志;1988年02期
14 E. K. Armitage;茆象千;;甲状旁腺素代谢和测定方法[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;1988年03期
15 杨华元,虞美云;假性甲状旁腺机能减退一例[J];苏州医学院学报;1989年03期
16 Whiteheap ,R.G ,黄祝封;猫的甲状旁腺素对于吸收同位素 P~(32)组成三碱酸腺甙与骨盐的作用[J];黑龙江畜牧兽医;1960年03期
17 H.RASMUSSEN;王日宏;;甲状旁腺素性质和作用机制[J];生理科学进展;1964年02期
18 杨宁;张冬磊;;全段甲状旁腺素在胆源性急性胰腺炎患者中的变化研究[J];中国医药导报;2016年23期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 罗群;张祖懿;董虹;王庭玉;陈玉冲;刘东海;;维持性血液透析患者甲状旁腺素与白介素2/白介素2受体系统之间的关系[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
2 文力;王革非;冷武军;王贞慧;杨光;;人甲状旁腺素N端34肽基因的合成克隆和融合表达[A];湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集[C];2003年
3 张增利;郝莉;王小平;傅春玲;李林琳;李冰燕;;甲状旁腺素促进辐照小鼠造血功能的恢复及提高辐照小鼠存活率[A];中国毒理学会放射毒理专业委员会第七次、中国毒理学会免疫毒理专业委员会第五次、中国环境诱变剂学会致突专业委员会第二次、中国环境诱变剂学会致畸专业委员会第二次、中国环境诱变剂学会致癌专业委员会第二次全国学术会议论文汇编[C];2008年
4 张宁;李同侠;;肾性骨病中医证候演变及与全段甲状旁腺素水平相关研究[A];第10届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2009年
5 符静;;25例注射用重组人甲状旁腺素治疗绝经后骨质疏松症的疗效观察[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
6 刘海蔚;高勇义;陈开宁;方团育;张华川;陈道雄;全会标;陈赛语;;国产重组人甲状旁腺素(1-34)治疗绝经后妇女骨质疏松症的疗效观察[A];中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2012年
7 韩亚娟;王禹冰;沈洁;;重组人甲状旁腺素(1-34)治疗原发性骨质疏松症疗效观察[A];中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2012年
8 刘茂林;徐刚;宁锂;陈兆军;项捷;;维持性血液透析患者生长激素、催乳素、甲状旁腺素和甲状腺激素的变化及临床意义[A];中华医学会第11届全国内科学术会议论文汇编[C];2007年
9 刘茂林;徐刚;宁锂;陈兆军;项捷;;维持性血液透析患者生长激素、催乳素、甲状旁腺素和甲状腺激素的变化及临床意义[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年
10 郭于曦;朱红楠;;甲状旁腺素与降钙素在呼吸道灼伤早期诊断中的意义探讨[A];全国危重烧伤患者早期复苏对策专题研讨会论文汇编[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 修朝阳;I.人甲状旁腺素1~34肽的制备 II.人胸腺素α1的制备及其与干扰素α-1b的融合表达[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2002年
2 刘雅红;甲状旁腺素相关肽核定位序列和C末端在调节中枢神经系统发育中的作用及机制研究[D];南京医科大学;2013年
3 陈光明;先天性心脏病患儿的免疫和甲状旁腺功能状态[D];重庆医科大学;2002年
4 邱志杰;间断甲状旁腺素[PTH(1-34)]治疗促进去势雌性大鼠成骨能力及其机理的实验研究[D];苏州大学;2010年
5 梁华晟;高糖状态下甲状旁腺素受体1对INS-1细胞影响研究[D];南方医科大学;2010年
6 赵卫红;CRF高PTH对鼠心肌细胞钙转运、钙电流和钙通道α_(1G)mRNA表达的影响及钙三醇干预的研究[D];南京医科大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨磊;重组人甲状旁腺素对骨关节炎的作用及机制研究[D];中国人民解放军陆军军医大学;2019年
2 王海君;人甲状旁腺素(1-84)的表达及纯化[D];大连理工大学;2019年
3 苏凤籼;低甲状旁腺素血症与维持性血液透析患者蛋白质能量消耗的相关性研究[D];遵义医科大学;2019年
4 李明翰;蛋白激酶C通路特异性甲状旁腺素模拟肽在连续应用时对骨骼系统作用的研究[D];南方医科大学;2019年
5 张晋;52例原发性甲状旁腺功能亢进症的外科诊疗分析[D];山西医科大学;2019年
6 何友华;磷脂酶C非依赖的蛋白激酶C信号通路在甲状旁腺素调节骨与肌肉代谢中的作用初探[D];南方医科大学;2018年
7 崔珊珊;重组人甲状旁腺素1-34在毕赤酵母表达及纯化的研究[D];吉林大学;2009年
8 毕琳琳;注射用重组人甲状旁腺素(1-34)的Ⅰ期临床试验研究[D];第四军医大学;2007年
9 荆玉洁;血清钙、甲状旁腺素代谢与妊高征关系的研究[D];吉林大学;2004年
10 符静;25例注射用重组人甲状旁腺素(1-34)治疗绝经后骨质疏松症的疗效观察[D];山西医科大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李建国;甲状旁腺素和钙在促进骨形成中的相互作用及机制研究 获国家自然科学基金资助项目[N];科技日报;2007年
2 江苏 主任药师 陆基宗;中老年人补钙应“并行”[N];家庭医生报;2015年
3 季玉光;年轻常吃撑 老来骨疏松[N];大众卫生报;2009年
4 王廷兆;老年人谨防钙“搬家”[N];民族医药报;2009年
5 吕国梁;他们该不该补钙?[N];医药经济报;2004年
6 阿胜 编译;降钙降过了头?[N];医药经济报;2004年
7 曹燕 袁小瑜;补钙防不了骨折[N];农村医药报(汉);2005年
8 广州军区广州总医院老年病三科 曹淑芳;老人如何补钙[N];广东科技报;2000年
9 葛秋芳;动物实验显示:去除部分骨髓有助骨折自愈[N];新华每日电讯;2008年
10 本版编辑董欢霁 海上飞鱼;透析,要做就做夜猫子[N];医药经济报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978